姜黄素抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中的iNOS表达及其机理探讨

摘要

姜黄素（1,7-双（4-羟基-3-甲氧基苯基）-1,6-庚二烯-3,5-二酮），具有抗炎、抗氧化、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、抗HIV 病毒等作用，且毒性很低。
　　 细菌内毒素（endotoxin）,又称脂多糖（lipopolysacchairide，LPS）,它与蛋白质、磷脂等共同组成革兰氏阴性菌的外膜。用LPS处理巨噬细胞或动物能够引起类似于脓毒性休克的炎症反应。在大多数炎症介质中，NO 是内毒素血症和炎症反应的重要调节分子。诱导性一氧化氮合酶(iNOS)作为炎症部位NO 合成的调控因子成为治疗靶点。
　　 本篇文章主要是研究姜黄素抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中iNOS表达的机制。在转录水平、翻译水平和翻译后水平负调控iNOS组成了对该酶参与炎症反应的和谐调控。姜黄素抑制LPS诱导巨噬细胞RAW264.7释放NO，能明显抑制LPS诱导的JNK和p38的磷酸化，并抑制IκBα的降解，可见是通过MAPK、NF-κB信号通路对iNOS转录水平进行调节。在真核细胞中，蛋白质的泛素化和磷酸化是最常见的翻译后修饰。我们首次报导在翻译后水平上，姜黄素抑制iNOS酶活性。
　　 而iNOS酪氨酸磷酸化对其活性很重要。免疫共沉淀实验表明姜黄素能抑制iNOS酪氨酸磷酸化。进一步研究证实姜黄素通过抑制ERK磷酸化来调节iNOS酶活性。
　　 更重要一点，姜黄素缩短iNOS半衰期，蛋白酶抑制剂MG132敷RAW264.7细胞可以逆转姜黄素促进的iNOS蛋白降解，姜黄素促进iNOS蛋白与Ub的结合。姜黄素对iNOS基因表达的翻译后调控能有效抑制炎症中过多的NO释放，有良好的治疗炎症效果。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 绪论

第二章 iNOS真核表达载体的构建

第三章 Curcumin 抑制LPS 诱导的RAW264.7 中的iNOS表达及其机理研究

结论

参考文献

附录

致谢