肝癌和肝癌细胞系中NRAGE基因差异表达的检测及其机制的研究

摘要

肝癌(HCC)是世界上第五大常见癌症,致死率居第三位,并且肝癌的发病率还在不断上升。肝癌的发生是一个多因素的复杂过程,肝脏组织的丰富血供和旺盛的细胞分裂增殖能力使得肝癌成长十分迅速,因此肝癌的预先诊断和有效地杀伤癌细胞的治疗手段在肝癌治疗中尤为重要。
　　 近年来,鉴定与肿瘤转移相关的基因及研究这些基因的作用机制正逐渐成为肿瘤分子生物学的研究重点。更重要的是,这些基因有可能成为抗肿瘤转移的靶点以及诊断肿瘤、提示预后的指标。而NRAGE在肝癌中的特异性高表达,提示我们能否利用该基因的特性为肝癌的治疗开创一条新的基因治疗策略。
　　 NRAGE是MAGE家族中的一员,该家族一般只在肿瘤组织中表达,编码肿瘤特异性的抗原,可以被细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性地识别并杀伤肿瘤细胞,在肿瘤免疫治疗中具有重要意义。
　　 研究表明NRAGE作为p53的保护者,能促进p53蛋白的稳定性和转录活性。进一步研究发现,NRAGE能够干扰细胞骨架的形成,在细胞和动物水平显著抑制肿瘤细胞的转移;人为抑制内源性NRAGE基因的表达,能够明显增强肿瘤细胞的恶性表型;并发现NRAGE能够抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移。
　　 Sp1是一种广泛存在的核转录因子,参与调控数千种基因的表达,参与细胞生长分化、凋亡和免疫应答等一系列的细胞进程。在很多人类肿瘤中Sp1表达异常升高。很多促凋亡基因的启动子都含有Sp1结合位点,并且Sp1的过表达可以激活这些基因的转录。在肿瘤细胞中Sp1表达上调会促进p53介导的细胞凋亡。
　　 我们研究发现,NRAGE在肝癌细胞中高表达,低氧处理会诱使NRAGE在短时间内表达上调,因此可以确定NRAGE是癌细胞在低氧等恶劣环境下的应激反应因子之一。进一步研究发现在肝癌细胞中Sp1也处于高表达状态。于是我们推测,在人体肝癌中,当肿瘤生长到一定程度后,由于营养物质的不足及低氧酸性的微环境,细胞启动一系列应激反应,如细胞程序性凋亡等,导致Sp1表达上调,从而促进NKAGE基因的转录,而NRAGE蛋白在细胞内的富集又会促进p53的稳定性和活性,最终导致慢性的细胞凋亡。