象耳豆根结线虫生物学和分子生物学特征的研究

摘要

根结线虫(Meloidogynespp.)为植物根系内寄生物，可对农作物造成严重的危害。在中国迄今已记载的约30种根结线虫中，象耳豆根结线虫(M.enterolobiiYangandEisenback，1983)目前局限发生于海南省。为了评估该线虫的潜在经济危害性，以及提供控制其传播扩散的有效实用手段，对源自海南省的象耳豆根结线虫群体的寄主范围、mtDNA及rDNA位点的特征和PCR检测方法进行了研究。　　对4个代表性象耳豆根结线虫群体在10种常见经济作物15个品种上的繁殖力进行了测试。结果显示携带Mi基因的抗性番茄、菜豆、豇豆、茄子、黄瓜、西瓜、辣椒、烟草为象耳豆根结线虫的高度适宜寄主，大豆为低度适宜寄主，棉花为非寄主。寄主范围的测试结果提示象耳豆根结线虫是一种在中国具有潜在经济重要性的农作物病原物。　　对象耳豆根结线虫与其它常见根结线虫在mtDNA和rDNA位点的核酸序列的异同进行了比较分析。象耳豆根结线虫的mtDNA的C0Ⅱ-1rRNA基因间隔区的扩增产物约0.85kb，明显与南方根结线虫(M.incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)、花生根结线虫(M.arenaria)和北方根结线虫(M.hapla)4个常见种的不同；而象耳豆根结线虫的rDNA的ITS区和IGS2区的扩增产物分别约760和780bp，与4个常见种的扩增产物大小相似。rDNA-ITS序列比较分析揭示，象耳豆根结线虫与南方、爪哇、花生和北方根结线虫的ITS序列的同源性分别为87﹪，87﹪，87﹪和83﹪。rDNA-IGS2序列比较分析显示，象耳豆根结线虫与南方、爪哇、花生和北方根结线虫的IGS2序列同源性分别为84﹪，84﹪，84﹪和70﹪。　　研制了象耳豆根结线虫的快速PCR鉴定和检测方法。该方法的PCR引物的扩增目标为rDNA-IGS2区域，其设计依据象耳豆根结线虫与南方、爪哇、花生和北方根结线虫在该区域的核酸序列的差异。通过对6种常见根结线虫的不同地理群体及自然土壤线虫群体的测试，验证了PCR引物针对象耳豆根结线虫的特异性和可靠性。本方法具有快速、灵敏的特点，可日常用于象耳豆根结线虫单条线虫的直接鉴定以及混合土壤线虫群体中象耳豆根结线虫的检测。

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文摘

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上篇文献综述

第一章根结线虫的分布和危害

第二章根结线虫的种类鉴定和检测方法

第三章象耳豆根结线虫的研究进展及本研究的内容

参考文献

下篇研究内容

第一章 海南省象耳豆根结线虫群体的形态和同工酶鉴定及其寄主范围的测试

摘要

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第二章 象耳豆根结线虫与其它常见根结线虫在mtDNA和rDNA位点的比较分析

摘要

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第三章 象耳豆根结线虫快速分子鉴定和检测方法的研究

摘要

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

全文结论

附录

致谢