花生根结线虫致病相关基因的克隆与鉴定及分支酸变位酶基因功能的研究

摘要

以花生根结线虫(Meloidogynearenaria)一对无毒和毒性近等基因系(near-isogeniclines，NIL)为材料，用抑制差减杂交技术(SuppressionSubtractiveHybridization，SSH)，通过反向Northernblot和反转录聚合酶链式反应(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction，RT-PCR)筛选获得了22个在毒性和无毒M.arenaria间差异表达的cDNA片段。经过BLASTX分析，其中的12个cDNA片段与已知的基因没有同源性，其余的10个和新秀丽小杆线虫(Caenorhabditiselegans)、真菌和细菌的基因有较高的同源性。cDNA片段MAAV-117、MAAV-136、MAAV-270和MAAV-551只在无毒的M.arenaria中表达，在毒性的M.arenaria中不表达。其余的18个cDNA只是表达量上有差异。没有发现只在毒性M.arenaria中表达，而在无毒M.arenaria中不表达的cDNA片段。利用该方法只建成了正向差减cDNA文库(用毒性根结线虫cDNA为Driver，无毒根结线虫cDNA为Tester)，反向差减cDNA文库(用无毒根结线虫cDNA为Driver，毒性根结线虫cDNA为Tester)的差减效率很低。该研究结果第一次表明，当根结线虫二龄幼虫和抗性寄主互作以后，无毒和毒性线虫群体之间基因表达有差异，而且都在无毒线虫群体中特异性表达，预示着这些差异表达的基因在线虫的致病力和无毒或毒性变异中起作用。

目录

文摘

英文文摘

前言

原创性声明及学位论文版权使用授权书

上篇文献综述第一章根结线虫与寄主互作的研究进展

上篇文献综述第二章根结线虫与寄主互作的研究技术和方法

上篇文献综述第三章植物抗线虫基因

上篇文献综述参考文献

下篇研究内容第一章抑制差减杂交法克隆花生根结线虫致病相关基因

下篇研究内容第二章代表性差异分析法克隆花生根结线虫致病相关基因

下篇研究内容第三章cDNA末端快速扩增方法扩增差异表达基因的全长cDNA序列

下篇研究内容第四章花生根结线虫分支酸变位酶cDNA的克隆和分析

下篇研究内容参考文献

附录

攻读博士学位期间发表或已被接受的研究论文

致谢