运输对猪下丘脑和垂体内源性阿片肽（EOP）系统相关基因表达的影响

摘要

为了研究猪运输应激的中枢神经内分泌调节机制，试验选取体重1989±1.58kg Hal<'NN<二花脸和Hal<'nn>皮特兰雄性健康猪各12头，随机均分为二花脸对照组、二花脸运输组、皮特兰对照组和皮特兰运输组，对照组不运输，运输组进行2小时的运输试验。运输结束15分钟后，运输组和对照组同时屠宰并采取下丘脑和垂体组织样提取RNA。用相对定量RT-PCR法检测了阿片促黑素皮质素原(Proopiomelanocortin， POMC)和μ鸦片肽受体(Mu Opioid Receptor，MOR)基因在二花脸对照组不同组织中的表达；2小时运输对Hal<'NN>二花脸生长猪和Hal<'nn>皮特兰生长猪下丘脑糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor，GR)、POMC、蛋白转化酶2(Prohormone Convertase 2，PC2)和MOR及垂体GR、POMC、蛋白转化酶1(Prohormone Convertase 1，PC1)、PC2和MOR基因表达影响，从基因表达水平探讨猪下丘脑和垂体内源性阿片肽(Endogenous Opioid Peptide，EOP)系统在运输应激反应中的作用。 1、POMC和MOR基因在猪不同组织中的表达水平比较 二花脸生长猪垂体中POMC mRNA表达水平最高，海马、肝脏、肾上腺和下丘脑中的表达丰度依次下降，背最长肌中的表达丰度最低。 二花脸生长猪下丘脑中MOR mRNA表达水平最高，肝脏、海马、肾上腺和垂体中的表达丰度依次下降，背最长肌中的表达丰度最低。 2、运输应激对Hal<'NN>二花脸生长猪下丘脑和垂体EOP系统相关基因表达的影响 Hal<'NN>二花脸生长猪经两小时运输后，下丘脑POMC mRNA的表达比对照组高72.36％，差异极显著(P<0.01)；PC2 mRNA的表达略高于对照组，差异不显著(P>0.05)；MOR mRNA的相对含量比对照组高24.62％，差异显著(P<0.05)；运输组GRmRNA的相对含量与比对照组相比差异不显著(P>0.05)。 Hal<'NN>二花脸生长猪经两小时运输后，运输组垂体GR mRNA的表达丰度与对照组相比，有下降的趋势(P=0.08)；POMC，PC1和MOR mRNA的表达量与对照组相比，差异不显著；但运输组PC2 mRNA的表达量显著低于对照组(P<0.05)，运输组PC2 mRNA的相对含量(0.74±0.06)相对对照组(0.93±0.04)下降了19.73％。 3、运输应激对Hal<'nn>皮特兰生长猪下丘脑和垂体EOP系统相关基因表达的影响 Hal<'nn>皮特兰生长猪经两小时运输后，下丘脑POMC mRNA的表达与对照组相比差异不显著(P>0.05)；PC2 mRNA的表达显著高于比对照组(P<0.05)；MORmRNA的表达与对照组之间差异不显著(P>0.05)；运输组GR mRNA的相对含量比对照组高34.32％，差异不显著(P>0.05)。 Hal<'nn>皮特兰生长猪经两小时运输后，垂体GRmRNA的表达与对照组相比，差异不显著(P>0.05)；运输组POMC，PC1和MOR mRNA的表达量与对照组相比，差异不显著(P>0.05)；但运输猪垂体中PC2 mRNA的表达量显著低于对照组(P<0.05)，运输组PC2 mRNA的表达比对照组低48.40％。 以上结果提示：(1)二花脸生长猪POMC和MOR的基因表达具有组织间差异(2)2小时运输对生长猪垂体POMC、PC1、GR和MOR mRNA的表达没有显著影响，PC2 mRNA的表达显著下降；(3)2小时的运输影响了Hal<'NN>二花脸和Hal<'nn>皮特兰生长猪下丘脑EOP系统相关基因表达，提示下丘脑EOP系统参与了运输应激反应调节；(4)Hal<'NN>二花脸猪下丘脑EOP系统对运输应激反应的敏感性高于Hal<'nn>皮特兰猪，这可能是导致Hal<'NN>二花脸猪和Hal<'nn>皮特兰猪对运输应激反应强度不同的原因之一。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：本文部分缩写的中英文对照

声明

引言

第一篇文献综述

第一章运输应激的研究进展

1应激的基本概念

2运输应激特点及应激源种类

3应激对神经-内分泌的影响

4运输应激的危害

参考文献

第二章POMC基因在下丘脑和垂体的表达与调控

1 POMC基因的概述

2 POMC在下丘脑和垂体的表达与调控

3调节POMC基因表达的细胞内机制

参考文献

第三章β-END与应激的研究进展

1 β-END的生物合成

2 β-END受体及其分布

3 β-END的生理作用

参考文献

第二篇试验研究

第四章运输对二花脸生长猪下丘脑和垂体EOP系统相关基因表达的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

本章小结

参考文献

第五章运输对皮特兰生长猪下丘脑和垂体EOP系统相关基因表达的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

本章小结

参考文献

结论

致谢

攻读硕士期间发表的论文