生物除草剂敌散克(Disancu)产业化关键技术的再改进

摘要

敌散克(Disancu)是利用马唐致病型菌株画眉草弯孢霉（Curvularia eragrostidis）Qz-2000发展的生物除草剂，其主要生物活性成分为Qz-2000的分生孢子。前期研究表明Qz-2000对马唐、千金子、稗草等禾本科杂草的致病力强，对玉米、大豆等主要农作物安全，易于工业化生产，且具有自主知识产权。因此，具有开发成商品化生物除草剂的良好前景。本文在前期的研究基础上对Qz-2000分生孢子的大批量生产、敌散克的配方和剂型等关键技术进行了改进，为将来敌散克的产业化和推广应用提供一定的理论基础和技术支持。
　　QZ-2000需要在无菌条件下进行培养及分生孢子生产，用常压灭菌替代高压灭菌，能够降低生物除草剂的大批量的生产对生产设备的要求，从而降低成本。在设计25min到65min间隔10min的处理梯度的试验研究，发现随着灭菌时间的延长对QZ-2000菌落生长大小及生长状况、产孢量、孢子萌发率、孢子致病力均有显著促进作用，在45min以上时，这种效应趋于最大。因此，综合考虑成本和效果，最终确定了常压灭菌45min，可进行实际生产。
　　敌散克生物除草剂需要与化学除草剂复配才能发挥良好的除草效果，利用有机酸复配可以替代低量化学除草剂，使产品完全有机化。通过草酸、乙酸与孢子的相容性试验，结果表明8750ppm及其以下浓度的草酸与孢子复配的孢子萌发率为72.86％或更高，8000ppm及其以下浓度的乙酸复配孢子的萌发率达到50％以上。进一步进行了不同有机酸浓度梯度的小杯和盆钵的除草活性试验，结果表明，1000ppm-4000ppm草酸与孢子的复配剂在14天后对马唐的株防效分别在80％和70％以下，但是8000ppm草酸与孢子的复配剂防效在90％和70％以上;1000ppm-4000ppm乙酸与孢子的复配剂在14天后对马唐的株防效分别在72％和70％以下，8000ppm乙酸与孢子的复配剂防效在90％和60％以上。有机酸与孢子复配具有明显增效作用，可用于田间防除试验。
　　继而进行了敌散克与有机酸复配田间控草的试验，结果显示在小区和大田试验中草酸浓度为1000ppm-4000ppm时马唐第四周防效在60％和71％以下，当草酸浓度为8000ppm时，小区和大田试验的8000ppm草酸与孢子的复配剂第四周防效分别在70％和80％以上，复配剂增效明显;乙酸浓度为1000ppm-4000ppm时马唐第四周防效在60％和65％以下，但8000ppm乙酸复配剂防效在65％和70％以上。综合考虑成本、效果等因素最终确定有机酸浓度为8000ppm在田间达到较好的控草效果，有一定的应用价值。
　　前期研制的敌散克油包水剂型实际应用中操作不便利且效果不稳定。利用复合凝聚法制备的微囊剂可克服这些问题。研究了制备QZ-2000微囊剂的方法，确定了助剂添加—搅拌—酸化—冷冻干燥工艺流程，筛选出水油质量比为1∶1.67，明胶、阿拉伯树胶浓度为2％，卵磷脂浓度为油质量的10％的助剂配比，微囊剂成型受搅拌和酸化时间影响。微囊剂的孢子萌发率、致病率测定也表明其有利于保持较强致病力。结果表明，在离体叶片实验中，孢子浓度为6×105个/ml及以上时，致病率达93％以上。小杯实验中，孢子浓度为1×106个/ml时孢子对马唐的株防效为82.3％。盆钵实验中，1000ppm-4000ppm有机酸与微囊剂复配株防效和鲜重防效分别为70％和85％以下，而6000ppm-8000ppm的复配剂株防效和鲜重防效分别约为80％和90％以上。1000ppm-8000ppm的乙酸复配剂的防效均在60％以下。
　　综上所述，一个合适的配方剂型，可以在一定程度上克服生物除草剂对湿度的依赖性。将有机酸与生物除草剂相结合，则可以提高生物除草剂的控草效果。将生物除草剂制成微囊剂，能够提高药效，提高生物除草剂的稳定性，并延长持效期。

目录

声明

摘要

前言

第一章 文献综述

1 生物除草剂

1．1 生物除草剂的优点

1．2 已经商品化的生物除草剂

1．3 生物除草剂的剂型的研究

1．4 生物除草剂的配方的研究

2 有关弯孢霉属真菌的研究

第二章 常压灭菌大批量生产弯孢霉菌株QZ-2000的分生孢子的研究

1 材料和方法

1．1 供试材料

1．2 仪器

1．3 基质的常压灭菌

1．4 分生孢子粉的获取

1．5 不同常压灭菌时间产孢量的测定

1．6 孢子萌发率的检测

1．7 孢子致病力的检测

1．8 数据统计与分析

2 结果与分析

2．1 不同常压灭菌时间对画眉草弯孢霉菌株QZ-2000的菌丝生长的影响

2．2 不同常压灭菌时间QZ-2000产孢量的测定

2．3 不同常压灭菌时间对QZ-2000孢子萌发率的影响

2．4 不同常压灭菌时间对QZ-2000分生孢子致病性的影响

3 讨论

第三章 有机酸与画眉草弯孢霉QZ-2000孢子复配的研究

1 材料与方法

1．1 供试材料与试剂

1．2 有机酸的初筛

1．3 有机酸的进一步筛选

1．4 有机酸对QZ-2000孢子萌发率的测定

1．5 有机酸对QZ-2000孢子致病性的测定

1．6 病情指数防效分级

1．7 数据统计与分析

2 结果与分析

2．1 有机酸对分生孢子萌发的影响

2．2 有机酸对分生孢子致病性的影响

2．3 有机酸复配的进一步筛选

3 讨论

第四章 有机酸与画眉草弯孢霉菌QZ-2000孢子复配的田间控草技术研究

1 材料与方法

1．1 供试材料

1．2 防除马唐的田间实验

2 结果与分析

2．1 2012年7月份小区实验结果

2．2 2012年9月份小区实验

2．3 2012年6月到9月份大田试验

3 讨论

第五章 画眉草弯孢霉菌QZ-2000新剂型微囊剂的研究

1 材料与方法

1．1 试剂与材料

1．2 仪器

1．3 复合凝聚法制作微囊剂的操作步骤

1．4 微囊剂包封率的测定

1．5 复合凝聚法制备QZ-2000微囊剂的条件的研究

1．6 微囊剂的粒径测量方法

1．7 画眉草弯孢霉菌QZ-2000微囊剂分散悬浮性能的测定

1．8 微囊剂润湿性能的测定

1．9 QZ-2000微囊剂致病力的测定

1．10 QZ-2000微囊剂小杯实验

1．11 数据统计与分析

2 结果与分析

2．1 复合凝聚法制备QZ-2000微囊剂的条件的研究

2．2 画眉草弯孢霉菌QZ-2000微囊剂分散悬浮率性能的测定

2．3 画眉草弯孢霉菌QZ-2000微囊剂润湿时间的测定

2．4 微囊剂萌发率的测定

2．5 QZ-2000微囊剂致病力的测定

3 讨论

全文讨论

参考文献

致谢