产酶溶杆菌抗菌活性物质产率促进及其应用

摘要

农业生产中，化学农药的长期使用，导致了生态环境的恶化，为此，开发环境友好的生物源农药成了重点研究领域。
　　产酶溶杆菌是一株新型生防菌，其次级代谢产物HSAF具有广谱的抗真菌活性，可以开发为良好的生物源农药，为达到此目的，本研究分3步进行了培养基优化试验:1.通过替换不同氮源及碳源，确立黄豆粉为最佳氮源，葡萄糖为最佳碳源，最佳氮源和碳源分别设置3个浓度（黄豆粉浓度为0.50％、0.70％、0.90％;葡萄糖浓度为0.30％、0.50％、0.70％）进行HSAF产率比较，初步得到碳氮源最佳配比:0.70％黄豆粉+0.50％葡萄糖;2.利用氮源和碳源最佳配比，比较不同无机盐对HSAF产量的影响;3.三因素三水平的正交试验，比较结果表明:黄豆粉0.70％、葡萄糖0.50％、氯化钙0.08％为最佳组合，其能够提高产酶溶杆菌HSAF产量13.9倍，且发酵成本可降低68％。除此以外，本研究还对产酶溶杆菌的发酵条件进行了优化，主要考虑了温度、转速及发酵时间等因素，HSAF在28℃，200 rpm，摇瓶60 h时产量最大。最后进行了刺激因子添加实验，采用产酶溶杆菌靶标生物禾谷镰孢菌的多糖物质作为刺激因子，观察其对HSAF的刺激作用，因实验条件有限仅得到了少量的粗多糖，实验结果表明，随着粗多糖添加量的增多，HSAF的含量呈不断下降的趋势。
　　为了进一步探明产酶溶杆菌OH11发酵产物对主要农业病害的防控效果，本研究采用优化后的培养基进行发酵、物理吸附、65℃烘干浓缩获得发酵液固化物，采用平板抑菌、盆栽和田间接种等方法，测试了发酵液固化物对几种农作物重要病害的防控效果。以其代谢产物HSAF的量表示，发酵产物对稻瘟病菌、稻纹枯病菌、禾谷镰孢菌的菌丝生长抑制EC50分别为2.1326、2.1457、3.6959μg/mL，对禾谷镰孢菌孢子萌发抑制EC50为12.2587μg/mL;对温室盆栽小麦白粉病具有保护和一定的治疗效果，用药22 d，10.24μg/mL发酵液的保护防效为58.15％，而150μg/mL三唑酮的保护防效为45.93％。田间处理14d，96.0 g a.i./hm2发酵液对小麦赤霉病保护与治疗效果分别为20.29％，21.14％，而1110.0 g a.i./hm2的多菌灵为13.39％，12.00％;2014年，自然发病情况下，田间处理28 d，1.53 ga.i./hm2发酵液对小麦赤霉病的防治效果达到76.40％，优于对照药剂300.0mL/hm2的30％苯甲·丙环唑乳油。由此可见，溶杆菌发酵产物对几种农作物重要病害均具有防治效果，具有开发利用前景。

目录

声明

摘要

上篇文献综述

第一章 生物防治

1 生防机制

2 生物农药

第二章 微生物次级代谢产物的应用

1 微生物次级代谢产物概念

2 微生物次级代谢产物的分类及结构

第三章 微生物发酵工艺优化策略

1 单因子试验设计

2 正交试验设计

3 均匀试验设计

4 响应面试验设计

5 人工神经网络与遗传算法

第四章 产酶溶杆菌的研究概况

1 溶杆菌的分类

2 产酶溶杆菌的生防作用

下篇研究内容

第一章 产酶溶杆菌OH11合成HSAF发酵条件的优化

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第二章 产酶溶杆菌发酵产物对几种重要农作物病害的防控研究

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

全文总结

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文

致谢