文心兰类原球茎玻璃化超低温保存及相关生理生化与组织学研究

摘要

文心兰是指兰科(Orchidaceae)文心兰亚族(Subribe Oncidiinae)文心兰属（Oncidium）植物。文心兰花型独特，其花序分枝性好，花型优美，花色鲜亮，其潇洒脱俗的花姿和温文尔雅的气质，被插花界誉为切花“五美人”之一，是洋兰界的新宠。目前，文心兰品种越来越多，种质资源的保存变得尤为重要。因此，建立有效地文心兰保存体系十分必要。
　　本文以文心兰类原球茎为材料，探讨了文心兰类原球茎玻璃化超低温保存的基本条件。研究结果如下:
　　1.以文心兰类原球茎为材料，研究了文心兰类原球茎玻璃化超低温保存的条件。结果显示，最佳保存条件为:超净工作台上干燥3h，经50％ PVS2预处理15min，100％PVS2于0℃脱水10min，冻存后40℃水浴化冻2min，用含蔗糖1.2mol/L的pH为5.8的1/2MS液体培养基洗涤3次，每次10min，细胞冻后存活率最大。
　　2.文心兰类原球茎经干燥预处理后，随着时间的延长，可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和抗氧化酶活性均呈现先升高后降低的趋势。说明材料经过干燥预处理其生理状态发生了较大的变化，有利于提高材料的抗冻性。本研究说明适宜的预处理和处理时间是保证较高存活率的关键。
　　3.，利用石蜡切片法对超低温保存各环节文心兰类原球茎进行组织学观察。结果表明:文心兰类原球茎经超低温保存后，细胞结构发生了较大变化，玻璃化过程与冷冻、化冻过程对类原球茎细胞造成了严重的损伤。预处理在改变材料生理状态的同时也降低了装载、玻璃化、冷冻和化冻过程造成的伤害。玻璃化过程前进行装载能降低直接进行玻璃化产生的严重脱水伤害。

目录

声明

摘要

引言

第一部分 文献综述

1 文心兰生物学特性

2 文心兰组织培养技术研究

3 植物种质资源超低温保存技术研究

4 本研究的目的与意义

第二部分 试验研究

第一章 文心兰类原球茎空气干燥-玻璃化法超低温保存条件的研究

1 材料与方法

2．结果与分析

3．讨论

4．结论

第二章 文心兰类原球茎干燥-玻璃化法超低温保存预处理过程中的生理生化研究

1 材料与方法

2．结果与分析

3．讨论

4．结论

第三章 文心兰类原球茎干燥-玻璃化结合法超低温保存过程中的组织学特征

1．材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 结论

全文结论

参考文献

致谢