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【6h】

促红细胞生成素对大鼠脑制备再灌注后STAT1和STAT3的影响及MRI的变化

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摘要

目的:研究促红细胞生成素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后信号转导子与转录激活子-1(signal transducers and activators of transcription-1,STAT1)和信号转导子与转录激活子-3(signal transducers and activators of transcription-3,STAT3)的影响及MRI改变。
  方法:雄性健康SD大鼠80只,随机分为假手术组(A)、脑缺血再灌注组(B)、生理盐水组(C)、促红细胞生成素组(D),每小组20只。采用线栓法阻断大鼠左侧大脑中动脉血流2h,再灌注24h,建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型。促红细胞生成素组及生理盐水组于脑缺血开始时分别腹腔注射促红细胞生成素和等量生理盐水。每组动物均于缺血2h再灌注24h时行MRI弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)、灌注加权成像(perfusion weighted imaging,PWI)、T2WI扫描,处死取脑后每组10只采用原位缺口末端标记法(terminaldeoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay,TUNEL法)分析细胞凋亡情况及HE染色,10只采用Western blotting检测STAT1、P-STAT1、STAT3、P-STAT3蛋白表达水平的变化。
  结果:MRI表现:假手术组DWI、PWI及T2WI未示异常,B、C、D组在T2WI、DWI上,可见左侧大脑半球内高信号区,边界较清,ADC值降低,PWI后处理图像显示左侧大脑中动脉供血区出现灌注缺损,CBV降低,MTT延长。与B、C组比较,D组DWI异常信号区相对面积、PWI灌注缺损区相对面积、rMTT值减小(P<0.05),rADC值及rCBV值较B、C组大(P<0.05)。B、C组T2WI、DWI异常信号区及PWI灌注缺损区相对面积比较无显著差异(P>0.05)。
  凋亡细胞数量:A组见个别凋亡细胞,B组及C组可见大量凋亡细胞,表现为细胞核呈棕色或棕褐色着染,核形呈碎点状,不规则,大小不一,D组凋亡细胞分布类似B、C组,但数量减少,差异有显著性(P<0.05)。HE染色:D组神经元坏死程度较B、C组轻。
  Western bloting半定量分析结果:STAT1、STAT3蛋白在正常脑组织中表达,且缺血2h再灌注24h及EPO干预后对二者表达水平均无显著影响,而P-STAT1、P-STAT3水平在正常脑组织中较低,缺血再灌注后表达显著增加,EPO干预后,与B、C组比较,D组的P-STAT3表达增加(P<0.05),而P-STAT1有所减小。
  结论:(1)脑缺血再灌注损伤早期给予促红细胞生成素可以减少脑缺血区凋亡细胞的数目,MRI显示脑梗死范围缩小。(2)应用促红细胞生成素后缺血区脑组织磷酸化STAT3表达明显增加,磷酸化STAT1表达有所减少。

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