脂联素对高糖环境下胰岛细胞增殖及氧化应激水平的影响

摘要

目的;观察脂联素（Adiponectin，ADPN）对体外高糖环境下大鼠胰岛细胞(INS-1)增殖及氧化应激水平的影响，并探讨其可能机制。
　　方法:将复苏后的INS-1培养于RPMI1640细胞培养液中，待细胞传代稳定后，取对数增殖期INS-1进行下列实验步骤:1.将INS-1随机分为正常对照组(NC组)、高糖组(HG组)、高糖+脂联素组（AD组）、高糖+SB203580（SB组）组分别培养24h、48h和72 h后，在倒置相差显微镜下观察细胞的形态学特性，并运用CCK-8法测定INS-1细胞的增殖情况。2.按照1中的分组及培养时间，采用黄嘌呤氧化酶法（羟胺法）、硫代巴比妥酸法（TBA法），分别测离心后的细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。3.按照1中的分组及培养时间，应用比色法测定离心后的细胞上清液中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。4.按照1中的分组及培养时间，通过Western blot技术检测上述各组中p-P38MAPK和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)的蛋白表达情况。
　　结果:(1)各组中INS-1细胞增殖活性测定结果:在24h、48h和72h与相应时间点的NC组相比，HG组、AD组、SB组，INS-1细胞的增殖活性受抑制，差异有统计学意义(P＜0.05);其中，AD组和SB组细胞增殖活性较HG细胞增殖活性改善，差异有统计学意义(P＜0.05)，AD组与SB组间的细胞增殖活性差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　(2)上清液中SOD、MDA水平测定:在24h、48h和72h与相应时间点的NC组相比，HG组、AD组、SB组SOD水平降低，MDA水平升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，与HG组相比，AD组与SB组SOD水平升高，MDA水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05），AD组与SB组间的SOD和MDA的差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　(3)上清液中T-AOC、GSH-Px水平测定:在24h、48h和72h与相应时间点的NC组比较，HG组、AD组、SB组T-AOC、GSH-Px含量下降，差异有统计学意义（P＜0.05）;AD组、SB组T-AOC和GSH-Px，较HG组升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，AD组与SB组间的T-AOC和GSH-Px差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　(4) p-P38MAPK，HO-1的蛋白表达水平测定:在24h、48h和72h与相应时间点的NC组相比，HG组、AD组、SB组的P38MAPK磷酸化水平较NC组显著升高，HO-1的蛋白表达水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05），其中AD组、SB组p-P38MAPK磷酸化水平较HG组降低，差异有统计学意义(P＜0.05); AD组、SB组HO-1的蛋白表达水平较HG组下调，差异有统计学意义(P＜0.05)，AD组与SB组间两种蛋白的表达水平，差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　结论:体外培养条件下，脂联素可通过改善高糖环境引起的胰岛细胞低增殖活性和高氧化应激水平，对胰岛细胞起到一定的保护作用;其机制与降低P38MAPK磷酸化水平有关。

目录

研究生个人简介

缩略词表

摘要

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

参考文献

氧化应激和脂联素与糖尿病关系的研究进展 综述

攻读硕士学位期间发表学术论文题目

临床培训小结

致谢

声明

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