JNK在大鼠利多卡因脊髓神经毒性中的作用研究

摘要

目的：探讨c-Jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase，JNK)在大鼠利多卡因脊髓神经毒性中的作用。
　　方法：成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠96只，体重240±20g，随机分成6组（n=16）:正常大鼠组（Ⅰ组）、假手术组（Ⅱ组）、JNK抑制剂(SP600125)组（Ⅲ组）、二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)组（Ⅳ组）、10％利多卡因组（V组）、JNK抑制剂+10％利多卡因组（Ⅵ组）。Ⅰ组不做任何处理，Ⅱ～Ⅵ组行鞘内置管术。置管后Ⅱ组不再做任何处理;Ⅲ组和Ⅳ组分别鞘内注射SP60012525μg和DMSO20μl;V组给予鞘内注射10％利多卡因20μl;Ⅵ组先鞘内注射SP60012525μg，30分钟后鞘内注射10％利多卡因20μl。于鞘内置管术前，鞘内给药前，鞘内给药后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d分别测定大鼠后肢机械缩足反射阈值(Mechanical paw withdrawal threshold，MWT)和热缩足反射潜伏期(Thermal withdrawal htency, TWL)。子给药后24h每组随机取4只大鼠取脊髓腰膨大标本，用Western blot法检测磷酸化JNK(p-JNK)及JNK的表达。各组另取4只大鼠的脊髓腰膨大，用原位末端缺口标记（TdT-mediated dUTP Nick-EndLabeling，Tunel）法检测脊髓神经细胞凋亡情况。
　　结果：行为学变化:与Ⅰ组比较，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的MWT、TWL差异无统计学意义（P＞0.05），V组MWT、TWL在给药后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d增加，给药后第5d恢复到给药前水平，差异有统计学意义(P＜0.05)，Ⅵ组MWT、TWL在给药后4h、8h、12h、1d、2d增加，给药后第3d恢复至给药前水平，差异有统计学意义(P＜0.05);与V组比较，Ⅵ组在给药后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d的MWT、TWL均较低，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　蛋白表达变化:Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组大鼠脊髓均有p-JNK表达，三组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。与Ⅰ组比较，Ⅲ组脊髓p-JNK表达降低，V、Ⅵ组脊髓p-JNK表达增多，差异有统计学意义(P＜0.05);与Ⅵ组比较，V组脊髓p-JNK表达增多，差异有统计学意义(P＜0.05)。各组脊髓JNK的表达差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　细胞凋亡:与Ⅰ组比较，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组脊髓神经细胞凋亡情况差异无统计学意义(P＞0.05);V、Ⅵ组脊髓神经细胞凋亡高于其他四组，差异有统计学意义(P＜0.05);V组较Ⅵ组凋亡更加明显，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论：鞘内预先注射JNK抑制剂SP600125可减轻利多卡因所致的大鼠脊髓神经毒性损伤，提示利多卡因所致的脊髓神经毒性与p-JNK表达增加有关。

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摘要

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

参考文献

利多卡因脊髓神经毒性的研究进展

攻读硕士学位期间发表学术论文

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致谢

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