Pit-1 siRNA对大鼠垂体生长激素腺瘤GH3细胞增殖和凋亡的作用研究

摘要

目的：研究垂体特异转录因子-1(pituitary-specific transcription Pit-1)基因对大鼠生长激素垂体腺瘤GH3细胞增殖、凋亡的影响，为阐明GH腺瘤的发病机制及基因治疗提供理论和实验依据。
　　方法：(1)用Lipofectamine2000将针对Pit-1基因的siRNA oligo转染垂体腺瘤GH3细胞；
　　(2)运用RT-PCR、蛋白免疫印迹等方法鉴定siRNA oligo Pit-1的沉默效率。实验分为沉默Pit-1基因组(转染Pit-1-siRNA oligo)和阴性对照组(转染NegativeControl siRNA oligo)。
　　(3)分别以流式细胞术和CCK8法检测沉默Pit-1对细胞凋亡、增殖能力的影响。
　　结果：(1)与阴性对照组相比，转染目的小干扰基因的细胞Pit-1基因的mRNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05)，干扰效果达60％-80%。
　　(2)与阴性对照组相比，沉默Pit-1基因组的细胞凋亡率均明显增加(P<0.05)。
　　(3)与阴性对照组相比，沉默Pit-1基因组的细胞增殖率明显降低(P<0.05)。
　　结论：沉默Pit-1基因表达可以抑制垂体肿瘤GH3细胞增殖，促进细胞凋亡。