磁性纳米四氧化三铁协同化疗药物及5-溴汉防己甲素在荷瘤鼠体内逆转耐药研究

摘要

目的:本课题旨在建立恶性血液病多药耐药（MDR）的动物实验模型，探讨磁性纳米四氧化三铁（Fe3O4-MNPs）协同5-溴汉防己甲素（BrTet）及化疗药物在动物模型体内逆转耐药的作用，研究逆转多药耐药的作用机理，为临床应用提供理论依据。 方法:1）建立恶性血液病多药耐药的动物模型：将具有典型MDR表型的K562/A02以及其亲本K562细胞分别接种于BALB/C裸鼠背侧皮下，接种细胞数为1×107细胞/只，利用小动物彩超确定肿瘤的形成。2）当肿瘤大小达75-150 mm3时，将其随机分为五组用药，（每组包括耐药荷瘤鼠和敏感荷瘤鼠各半）A组生理盐水0．2ml/天；B组单用柔红霉素（DNR）1mg/kg；C组Fe3O4-MNPs聚合DNR0．63mg/kg，；D组BrTet2．5mg/kg+DNR1mg/kg；E组Fe3O4-MNPs聚合DNR0．63mg/kg和BrTet2．5mg/kg。用药期间观察各组肿瘤成瘤率，生长特征，肿瘤重量、体积等特征。3）计算实验各组相对肿瘤体积，肿瘤抑制率以及重量抑制率。4）用药十天后处死动物，取各组肿瘤以及心、肾等脏器行组织病理学观察。5）使用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）以及免疫蛋白印迹试验（western blot）检测耐药肿瘤凋亡相关基因以及蛋白的表达。 结果:1）敏感肿瘤细胞以及耐药肿瘤细胞成瘤率均为100％；2）对于K562移植瘤，B、C、D、E四组之间肿瘤抑制率差异无显著性。对于K562/A02移植瘤，Fe3O4-MNPs协同DNR、BrTet可明显抑制移植瘤的增殖：处死时移植瘤体积为415．47±14．61mm3；相对肿瘤体积为4．88±0．11，肿瘤抑制率为（62．27±0．48）％，而单用DNR组的肿瘤抑制率仅为（3．67±0．08）％；3）同时肿瘤组织病理观察显示E组肿瘤细胞死亡明显，各实验组心肾脾等脏器无明显病理改变；4）Fe3O4-MNPs协同DNR和BrTet能够下调Bcl-2蛋白的表达，上调Bax、Caspase-3蛋白的表达，Real-time RT-PCR检测耐药细胞移植瘤显示Fe3O4-MNPs以及BrTet均可下调bcl-2 mRNA的表达，上调bax、caspase-3mRNA的表达，且两者联用具有协同作用，与对照组相比差异有显著性。 结论:以K562/A02细胞建立的裸小鼠耐药移植瘤模型，仍保持体外的耐药活性。在耐药肿瘤动物模型体内，Fe3O4-MNPs协同DNR和BrTet具有很强的肿瘤抑制作用，其作用可能于增加肿瘤细胞内化疗药物浓度促进肿瘤细胞凋亡有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词

声明

前言

文献综述：肿瘤细胞多药耐药机制及逆转的研究进展

第一部分 材料与方法

第二部分 试验结果

第三部分 讨 论

全文小结

致 谢

参考文献

作者简介