组织工程化胆管中组织细胞来源及与支架复合实验研究

摘要

目的：探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)定向分化为肝干细胞，从而进一步分化为胆管平滑肌细胞及内皮细胞的可行性，并观察分化胆管平滑肌细胞及内皮细胞与高分子材料PLGA生物相容性，为组织工程胆管种子细胞及支架材料的选择提供初步实验依据及理论基础。
　　 方法：(1)体外培养并纯化大鼠MSCs，通过定向诱导分化方法，将其分化为胆管平滑肌细胞及内皮细胞，并通过形态学及RT-PCR方法对分化完成的细胞类型加以鉴定。(2)分化的胆管平滑肌细胞及内皮细胞与支架复合培养，通过倒置显微镜、细胞粘附率测定和MTT法观察细胞在支架上的生长情况。
　　 结果：(1)体外定向诱导分化MSCs四周后，细胞呈现典型树枝状胆管内皮细胞形态学改变，RT-PCR法显示分化细胞对细胞表面标记CK19高表达；体外定向诱导分化MSCs八周后，细胞呈现典型类纺锤样平滑肌细胞形态学改变，RT-PCR法显示分化细胞对细胞表面标记ASMA、SM22、caldesman高表达。(2)分化细胞与支架复合培养，通过细胞粘附率测定及MTT法证明细胞在支架上增殖能力良好。
　　 结论：(1)骨髓间充质干细胞(MSCs)体外经定向诱导分化具有向平滑肌细胞及内皮细胞分化能力。(2)诱导分化后的细胞与支架具备良好生物相容性。