软骨细胞和骨髓间充质干细胞体外共培养的成瘤危险性的研究

摘要

目的:明确软骨细胞和BMSCs共培养可构建组织工程软骨，探讨共培养的种子细胞成瘤危险性。这对于明确软骨细胞和BMSCs同时作为软骨组织工程种子细胞的安全性具有重要意义，并为临床应用于治疗软骨损伤高龄患者提供理论基础和实践依据。
　　方法:
　　(1)软骨细胞和BMSCs共培养:
　　1)体外培养条件下获得兔软骨细胞及BMSCs，取第三代的软骨细胞和BMSCs，分5组进行细胞培养，分别是软骨细胞组、BMSCs组、及2∶1、1∶1、1∶2混合组，每组细胞总数相等。在体外培养两周。
　　(2)软骨细胞和BMSCs共培养后的自发肿瘤形成:
　　1)将软骨细胞和BMSCs混合后体外长期共培养，检测其c-myc的表达量;
　　2)检测软骨细胞和BMSCs共培养的上清液中VEGF的含量。
　　结果:
　　(1)兔骨髓间充质干细胞经诱导后可分化成骨细胞、软骨细胞及脂肪细胞;
　　(2)体外长期培养条件下，不同比例混合共培养的兔骨髓间充质干细胞及软骨细胞，其c-myc的表达量为阳性，且随着软骨细胞比例的增多，c-myc的表达水平提高;
　　(3)体外长期培养条件下，不同比例混合共培养的兔骨髓间充质干细胞及软骨细胞，其上清液中VEGF的含量均为阴性。
　　结论:体外二维培养条件下，不同比例兔骨髓间充质干细胞与兔软骨细胞共培养，其VEGF表达均为阴性，而c-myc表达为阳性，且表达水平随着软骨细胞所占比例的增多而提高。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一章 文献综述 软骨损伤修复及BMSCs的研究进展

关节软骨的结构

传统关节软骨修复技术

骨髓间充质干细胞

第二章 材料与方法

1．实验材料

2．技术路线

3．实验方法

第三章 结果

1．分离培养的兔骨髓间充质干细胞的形态

2．兔BMSCs多向分化能力的鉴定

3．兔骨髓间充质干细胞表面标记物的表达

4．利用Western blotting检测c-myc的表达量

5．利用ELISA法检测细胞上清液中VEGF的含量

第四章 讨论

结论

致谢

参考文献

作者简介