冠心病发病危险因素及炎症基因变异与疾病预后的关联研究

摘要

研究背景:
　　冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary artery disease，CAD)是21世纪以来对人类健康威胁最大的主要疾病之一。自上世纪90年代以来，中国人群冠心病的发病率和死亡率迅速增长，成为威胁我国居民健康的重大公共卫生问题之一。冠心病是一种多因素疾病，受遗传因素和环境因素共同影响，其中遗传因素在冠心病的发生和发展中发挥了重要作用。随着对冠心病发病机制的深入研究发现，IL-1家族在免疫炎症的机制中起着重要的调节作用，其中IL-1B的产生可以改变内皮的许多功能，从而影响动脉粥样硬化的形成过程，同时还能调节内皮细胞促凝活性的产生导致形成血栓;而IL1f7可以通过抑制炎性细胞因子的生产和激活巨噬细胞从而发挥对动脉粥样硬化相关疾病的保护作用。IL-3是免疫系统的一个主要组成部分，并在调节多种成熟细胞的生长、分化及基因的相关表达上起着关键性的作用。IL-18在免疫调节、抗感染、抗肿瘤及慢性炎症性疾病发病过程中起着重要作用。它能影响动脉粥样斑块的形成和发展，在动脉粥样斑块中可检测到IL-18的高度表达，其表达程度与斑块的不稳定性相关。单核苷酸多态性(SingleNucleotide Polymorphism，SNP)改变是人类遗传性的变异中最常见的一种变异形式。炎症基因关键SNPs位点的改变，可造成了炎症相关蛋白复合体的改变，最终造成炎症反应的变化。研究显示，IL-1细胞因子参与动脉粥样硬化和动脉瘤形成的发病，并且IL-1基因簇的不同等位基因的变异与动脉粥样硬化相关。IL1B rs16944 TT位点变异与细胞因子的大量释放或严重的炎症疾病相关联。IL3 rs2073506、IL18 rs360719、IL18Rrs13015714和IL18RAP rs917997位点的多态性与多种疾病的发生发展相关联。在过去文献报道中，我们发现IL-1、IL-3、IL-18能参与多种炎症反应，但位点多态性的改变与冠心病的发生发展关联性研究的报道较少。为此，本次研究我们通过病例对照研究设计分析冠心病发生的相关危险因素;随访研究设计对IL1A rs1800587 C＞T，IL1B rs16944G＞A,IL1f7rs3811047 G＞A,IL3 rs40401 C＞T,IL3 rs2073506 G＞A,IL18 rs360719 A＞G,IL18R rs13015714 G＞T，IL18RAP rs917997 C＞T八个位点的遗传变异与冠心病的不良心血管事件(全称，MACE)的关联进行探讨。
　　研究目的:
　　(1)采用病例对照研究设计，探讨冠心病的危险因素和其作用强度以及危险因素间的交互作用。
　　(2)探讨炎症基因变异(IL1A rs1800587 C＞T，IL1B rs16944 G＞A，IL1f7 rs3811047 G＞A，IL3 rs40401 C＞T, IL3 rs2073506 G＞A,IL18 rs360719 A＞G,IL18R rs13015714 G＞T,IL18RAP rs917997 C＞T)与冠心病不良心血管事件的关联，以及基因与某些环境因素在不良心血管事件发生中的交互作用。
　　研究方法:
　　1、病例对照研究:研究对象来源于东南大学附属中大医院心内科，将其中经冠状动脉造影检查确诊的冠心病患者作为病例组，非冠心病个体作为对照组，进行流行病学调查、并收集体格检查资料、病史信息和相应的生化检测指标。
　　2、随访研究:研究对象来源于东南大学附属中大医院心内科，经冠状动脉造影检查确诊的冠心病住院患者1013例，通过八年的随访，以出现不良心血管事件或因心血管死亡作为终点事件，最终获得有效病例711例。采集血样，提取基因组DNA，使用SNPscanTM的基因分型方法，检测研究对象的IL1A rs1800587 C＞T，IL1B rs16944 G＞A，IL1f7 rs3811047 G＞A,IL3 rs40401 C＞T,IL3 rs2073506 G＞A,II18 rs360719 A＞G,IL18Rrs130157.14 G＞T，IL18RAP rs917997 C＞T八个位点基因多态性。
　　3、资料处理和分析:数据库的建立采用Epidata，用SPSS21.0进行统计分析。使用频数分布、中位数等描述性分析、t检验、x2检验、多因素Logistic回归、Log-rank检验、多因素Cox回归、叉生分析等统计学方法对基因分型结果和流行病学调查资料进行分析。
　　研究结果:
　　1、纳入病例对照研究的经CAG诊断的冠心病患者1741人，对照人群799人，共计2540人。冠心病患者人群和对照人群比较，性别、年龄、BMI、高血压、糖尿病、吸烟、饮酒、工作强度、平时体育锻炼频率及临床生化指标中空腹血糖、载脂蛋白A、脂蛋白a、总胆固醇，低密度脂蛋白和高密度脂蛋白和本次入院心脏彩超LVEF(％)在两组间的分布差异存在统计学意义(P＜0.05)。
　　冠心病患者与对照组人群相比较，单因素logistic回归分析结果显示，男性、年龄大于60岁、BMI＞24(kg/m2)、有高血压、糖尿病病史、吸烟、高水平脂蛋白a、高水平甘油三酯能增加冠心病的发病风险。载脂蛋白A和高水平高密度脂蛋白分别降低了27％和42％的冠心病发病风险(Adjusted OR=0.63，95％CI:0.52-0.77; Adjusted OR=0.58,95％CI:0.48-0.70)，考虑其为冠心病发病的保护因子。多因素logistic回归显示，冠心病发病的危险因素为年龄、高血压病史、糖尿病病史、吸烟，并且在年龄与高血压、年龄与糖尿病、高血压和吸烟之间在冠心病发生中存在正交互作用。
　　2、随访研究显示IL3 rs2073506 G＞A基因多态性与冠心病不良心血管事件(MACE)有关联，以IL3 rs2073506 GG基因型为参照，携带IL3 rs2073506 GA基因型个体冠心病MACE的发生风险增加了35％(HR=1.35，95％CI:1.08-1.68);同时显性模型中，以IL3 rs2073506 GG基因型为参照，携带IL3 rs2073506 GA/AA基因型个体冠心病MACE的发生风险增加了32％(HR=1.32，95％CI:1.07-1.65)。多因素COX逐步回归分析发现，患有糖尿病的患者发生MACE的发病风险较非糖尿病者增加46％(HR=1.46，95％CI:1.14-1.87)，具有高水平C反应蛋白的患者发生冠心病MACE的发病风险增加157％（HR=2.57，95％CI:2.00-3.30），冠脉病变3支及以上的患者发生冠心病MACE的发病风险增加38％(HR=1.38，95％CI:1.05-1.81)。叉生分析结果显示IL3 rs2073506基因变异和糖尿病病史在MACE发生中存在正交互作用，IL3 rs2073506基因变异个体同时患有糖尿病时，其发生冠心病MACE中有5％是由于两种危险因素交互作用所致。
　　研究结论:
　　1、冠心病危险因素包括糖尿病病史、高血压病史、吸烟等，并且年龄与高血压、年龄与糖尿病、高血压和吸烟在冠心病发生中存在正交互作用。
　　2、IL3 rs2073506 G＞A多态性改变可增加冠心病不良心血管事件的发生风险。其与糖尿病病史之间存在正交互作用。

目录

声明

摘要

缩略词中英文对照

前言

第一章 冠心病危险因素的病例对照研究

1．1 研究对象与方法

1．1．1 研究对象

1．1．2 调查方法与内容

1．1．3 统计与分析方法

1．2 结果

1．2．1 冠心病病人与非冠心病病人的一般信息比较

1．2．2 冠心病组和对照组之间临床生化指标及血脂水平的比较

1．2．3 冠心病相关危险因素的logistic回归分析

1．2．4 冠心病危险因素之间的交互作用分析

1．3 讨论

第二章 IL-1，IL-3，IL-18基因变异与冠心病不良心血管事件的关联研究

2．1 研究对象与方法

2．1．1 研究对象

2．1．2 随访调查内容与方法

2．1．3 SNPs检测方法

2．1．4 统计与分析方法

2．2 结果

2．2．1 冠心病随访患者的一般情况

2．2．2 所选SNPs位点的基本信息

2．2．3 相关SNPs及冠脉病变与冠心病MACE关联的单因素分析

2．2．4 冠心病不良心血管事件发生的危险因素COX回归分析

2．2．5 IL3 rs2073506 G>A基因变异与冠心病MACE危险因素之间的交互作用分析

2．3 讨论

2．3．1 相关危险因素与冠心病MACE的关联

2．3．2 炎症基因相关位点变异与冠心病MACE的关联

2．3．3 关于交互作用分析

小结

参考文献

附录

综述：冠心病炎症机制的研究进展

致谢

作者简介