MMP-9调控EGFR信号通路对肝再生的作用研究

摘要

众多人体器官中，唯独肝脏具有强大的修复与再生功能，深入阐明这种再生功能的机制有利于治疗各种肝脏疾病。目前研究认为肝再生(Liver regeneration)是一个非常复杂但受精确调控的过程，并把涉及其中的机制与因子主要分为三类:细胞因子信号通路、生长因子信号通路和代谢网络信号通路。已有研究报道基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)在肝再生中扮演极其重要的积极角色，但是其中相关机制尚未完全明了。
　　目的：利用MMP-9敲除鼠，通过建立百分之七十肝切除模型来探讨MMP-9调控表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EFGR)信号通路在肝再生中的作用及其具体机制。
　　方法：肝切除模型分为以下三组：假手术组（施行开关腹手术）；对照组（野生型小鼠建立肝切除模型）；敲除组（MMP-9敲除鼠建立肝切除模型）。术后在相应时间点采血取肝，检测肝再生情况、EGFR配体、EGFR信号通路下游蛋白表达水平等。
　　结果：MMP-9敲除小鼠较野生型小鼠在肝切除术后:肝再生延迟，早期EGFR配体双调蛋白(Amphiregulin，AR)和肝素结合型表皮生长因子(heparin-binding epidermal growth factors, HB-EGF)表达下调，EGFR激活延迟。同时EGFR下游信号转导与转录激活因子-3(Signal transducer and activatorof transcription-3，STAT3)，核因子κB(NF-κB)，细胞周期蛋D1(cyclinD1)表达与EGFR一致下调。
　　结论：MMP-9在肝再生中的重要作用是通过调控EGFR配体来影响EGFR信号通路的激活，从而进一步影响细胞增生信号。

目录

声明

摘要

前言

一、实验材料

1．实验动物

2．实验试剂与耗材

3．实验仪器设备

二、实验方法

1．实验设计

2．实验技术

三、实验结果

3．1 小鼠PH术后MMP-9的表达情况

3．2 小鼠PH术后采用肝重体重比、HE染色、PCNA免疫组化分析评价小鼠肝再生情况

3．3 PH术后采用RT-PCR和ELISA技术分析评价EGFR配体表达情况

3．4 PH术后采用Western Blot技术分析评价EGFR及其下游信号分子的表达情况

3．5 MMP-9敲除鼠在外源补充AR后，肝重体重比及PCNA免疫组化显示其肝再生能力恢复，与对照组无明显差异

四、讨论

五、结论

参考文献

文献综述 肝再生的研究与现状

附录

攻读硕士学位期间发表文章情况

致谢