血清外泌体通过ERK1/2发挥抵抗H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡的作用

摘要

本文从以下几个部分展开论述： 第一部分 血清外泌体对H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡的保护作用 目的：外泌体是由各种细胞分泌的一种脂质双层封闭的细胞外小囊泡,它被体内的多种类型的细胞分泌排出细胞进入体液，如血液、乳汁、唾液等，均可携带具有功能活性的囊泡内容物进行细胞间的生物信号传递，在机体生理和病理过程中都发挥着重要作用。外泌体参与了机体各种复杂的生物学效应，如调控细胞的分化、增殖、衰老、凋亡等。在心脏血管系统，外泌体参与了心肌细胞的存活、心脏细胞再生、心室重构、血管新生等过程。本研究旨在体外研究外泌体对于大鼠心肌细胞H9C2的凋亡损伤是否有保护作用。 方法和结果： 1、通过免疫印迹法检测发现本实验中所提取的外泌体的表面标志物CD63呈阳性，表明提取的外泌体可以用于本研究。 2、在用双氧水诱导的凋亡的大鼠心肌细胞模型中，通过免疫印迹法和流式细胞检测两种方法发现经外泌体处理的心肌细胞跟PBS液处理的对照组相比，凋亡细胞所占总细胞数的百分比明显下降，存活细胞所占的百分比增加。同时，伴随BCL2蛋白的表达量增高、BAX蛋白的表达量下降、cleaved caspase3/caspase3明显下调。 结论： 外泌体可以抵抗双氧水诱导的大鼠心肌细胞发生凋亡，促进心肌细胞的存活。 第二部分 血清外泌体通过ERK1/2发挥抵抗H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡的作用 目的：在心血管系统，外泌体参与心肌细胞的存活、心脏再生、心室重构、血管新生等过程。在第一部分研究中已经明确外分泌体对H2O2致凋亡心肌细胞有保护作用，本研究在上述实验基础上研究外泌体对于大鼠心肌细胞H9C2的凋亡损伤是否有保护作用及其涉及的基本分子机制。 方法和结果： 1、通过免疫印迹法检测发现，不管是在正常的基础条件下还是双氧水诱导凋亡的条件下，在外泌体处理过的大鼠心肌细胞H9C2中，p-ERK1/2蛋白的表达量增加。 2、通过流式细胞检测进行的功能挽救实验发现，在用双氧水诱导的凋亡的大鼠心肌细胞中，给予外泌体处理的同时添加p-ERK1/2抑制剂会取消外泌体单独处理时发生的凋亡细胞所占百分比下降且存活细胞所占的百分比增加的保护效应。 结论： 1、外泌体通过ERK1/2发挥上述保护效应。

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