MMP-9基因1562C/T多态性与糖尿病氧化应激及颈动脉硬化的相关性研究

摘要

目的：探讨血浆MMP-9水平及其基因1562C/T多态性与延边地区2型糖尿病（T2DM）氧化应激及颈动脉硬化的相关性。
　　研究方法:随机选取延边地区正常对照组(normal glucose tolerant,NGT)50例，其中朝鲜族23例，汉族27例；T2DM患者180例，分为颈动脉硬化组92例：其中朝鲜族52例，汉族40例，无颈动脉硬化组88例：朝鲜族41例，汉族47例；血浆MMP-9水平测定采用酶联免疫法（ELISA），DNA测序法测定PCR片段MMP-9基因序列，氧化应激指标：活性氧活力(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）采用ELISA法测定，颈动脉内膜-中层厚度（intima-media thickness,IMT）用彩色多普勒测定，并记录观测相关临床指标。所得的数据用SPSS18.0软件进行统计学分析，结果以X-S表示，两组数据比较用独立样本t检验，各组间均数比较采用方差分析，比较有差异者进行两两比较，各变量之间的关系用相关分析，颈动脉粥样硬化病变的危险因素筛选采用Logistic回归分析。
　　结果：
　　（1）延边地区T2DM组氧化应激(ROS、MDA)指标高于正常组，（P<0.05）但抗氧化(SOD)指标低于正常组（P<0.05），且T2DM颈动脉硬化组氧化指标（ROS、MDA）高于T2DM组（P<0.05），但抗氧化指标（SOD）低于T2DM组（P<0.05）。
　　（2）延边地区T2DM组CT/TT基因型频率与NGT组CT/TT基因型与C、T等位基因频率比较无明显差异（P>0.05）；T2DM组中颈动脉硬化组CT/TT基因型频率及C、T等位基因频率高于无颈动脉硬化组，两组比较有统计学差异（P<0.05）。
　　（3）T2DM颈动脉硬化组CT+TT基因型者血浆MMP-9水平及氧化应激指标(ROS、MDA)高于T2DM组，但抗氧化指标(SOD)低于T2DM组，且T2DM组CT+TT基因型者血浆MMP-9水平及氧化应激指标(ROS、MDA)高于NGT组，抗氧化指标(SOD)低于NGT组，比较有统计学差异（P<0.05）。
　　（4）延边地区T2DM颈动脉硬化组朝鲜族、汉族之间基因CT+TT/CC多态性血浆MMP-9水平与氧化应激指标(ROS、SOD、MDA)比较无统计学差异（P>0.05）；T2DM组朝鲜族、汉族之间基因CT+TT/CC多态性血浆MMP-9水平与氧化应激指标(ROS、SOD、MDA)比较无统计学差异（P>0.05）。
　　（5）2型糖尿病患者氧化应激指标(ROS、MDA、SOD)与年龄、病程、SBP、FBG、PBG、TG、HDL-C、基因型均相关，但民族、DBP、糖化血红蛋白、LDL-C等无直接关系。
　　（6）颈动脉硬化组与无颈动脉硬化组比较颈动脉硬化组年龄、病程、SBP、血浆MMP-9水平等显著高于无颈动脉硬化组（P<0.01），与TG、HDL-C高于无颈动脉硬化组（P<0.05），两组间比较有统计学差异，其余各项指标无统计学差异（P>0.05）。
　　（7）Logistic回归分析结果显示：与延边地区颈动脉硬化危险相关的因素：年龄、病程、收缩压（SBP）、血浆MMP-9水平、基因型等因素进入主效应模式。其结果表明，收缩压、MMP-9水平、基因型与颈动脉硬化密切相关。
　　结论：
　　（1）血浆MMP-9水平及其基因-1562C/T多态性与糖尿病氧化应激有相关，但延边地区朝鲜族与汉族之间无民族差异。
　　（2）血浆 MMP-9水平及其基因-1562C/T多态性与糖尿病颈动脉硬化相关，T等位基因可能是糖尿病颈动脉硬化的易感基因。
　　（3）血浆MMP-9水平及其基因多态性与糖尿病氧化应激及动脉硬化具有相关性，MMP-9可能通过氧化应激导致糖尿病颈动脉硬化。

目录

声明

第一章 前 言

第二章 实验材料

2.1 实验仪器

2.2 主要试剂

第三章 实验方法

3.1实验设计流程

3.2 对象选择及分组

3.3 临床资料及样本采集

3.4 ELISA法测定血浆MMP-9水平

3.5基因组DNA提取、DNA浓度及纯度测定

3.6 PCR-RFLP体外扩增目的基因片段

3.7 MMP-9-1562C/T基因多态性

3.8 ELISA法测定氧化应激指标（ROS/MDA/SOD）

3.9 生化指标及颈动脉IMT的测定

3.10 统计学分析

第四章 结 果

4. 1基因组DNA提取结果

4. 2血浆MMP-9基因测序图

4.3统计结果

第五章 讨 论

1 氧化应激与T2DM及其颈动脉硬化的相关性

2 血浆MMP-9水平及其基因及其多态性与T2DM颈动脉硬化的相关性

3 血浆MMP-9水平及其多态性与T2DM氧化应激及颈动脉硬化的相关性

4 糖尿病颈动脉硬化危险因素分析

第六章 结 论

参考文献

致谢

综述:基质金属蛋白酶-9与2型糖尿病氧化应激及动脉硬化的相关性研究