抗真菌药与抗生素联用对棘阿米巴的杀伤作用

摘要

目的：棘阿米巴属Acanthamoeba spp.的阿米巴为广泛生存在自然界的原生物，可导致棘阿米巴角膜炎、肉芽肿阿米巴脑炎、皮肤感染等。目前，中枢神经系统受棘阿米巴感染常无特效药，而药物联合应用作用于棘阿米巴有较好的效果[1]。因此本研究通过培养棘阿米巴，观察阿米巴生长因受抗真菌药物与抗生素联合应用产生的抑制作用。
　　醋酸卡泊芬净(Caspofungin acetate，cancidas.Ca)是抗真菌类抑制剂，破坏真菌细胞壁，使细胞渗透性溶解杀死微生物。两性霉素B（Amphotericin B.Am）是抗真菌类药物，使正常的细胞代谢受破坏,生存受到抑制。阿奇霉素(Azithromycin.Az)为大环内酯类抗生素。对厌氧菌等抑菌作用较强。根据以上药物抗菌作用和不同作用位点来对棘阿米巴的杀伤作用进行实验研究。采用抗真菌和抗生素联合应用，观察棘阿米巴形态、增值速率的变化，探讨在体外对棘阿米巴的杀伤作用，为临床应用起到了实验依据。
　　方法：实验单独用药为卡泊芬净250μg/ml、两性霉素B5μg/ml，卡泊芬净和两性霉素联合用药B浓度为250μɡ/ml和5μɡ/ml、100μɡ/ml和5μɡ/ml。卡泊芬净和阿奇霉素250μɡ/ml和10mɡ/ml、100μɡ/ml和10mɡ/ml。两性霉素B和阿奇霉素联5μɡ/ml和10mɡ/ml、1μɡ/ml和10mɡ/ml。将棘阿米巴分别放入各组中，观察各实验组在体外作用4h、8h、24h、48h、72h时，在倒置显微镜下棘阿米巴形态、细胞数变化。
　　结果：两性霉素B和阿奇霉素联合5μɡ/ml和10mg/ml作用48h后对棘阿米巴的抑制生长作用明显（P<0.01）。卡泊芬净和两性霉素B浓度为250μɡ/ml和5μɡ/ml，在48h作用明显（P<0.01）。卡泊芬净和阿奇霉素浓度为250μɡ/ml和10㎎/ml在8h后作用更加明显（P<0.01）。在联合用药与单独用药比较时，两性霉素B和阿奇霉素联合用药浓度为5μg/ml和10mg/ml作用24h后，作用优于单用两性霉素B，48-72h后作用显著优于单用两性霉素B。卡泊芬净和两性霉素联合浓度为250μg/ml和5μg/ml作用在8h后，优于单用两性霉素B、卡泊芬净。作用48h以后，作用显著优于单独用药。卡泊芬净和阿奇霉素浓度为250μg/ml和10mg/ml作用4h后优于单用卡泊芬净。作用8h后显著优于单用卡泊芬净，作用24h以后作用更加显著。因此可以看出联合用药作用效果明显优于单用卡泊芬净、两性霉素B。
　　结论：与单独用药比较时，两性霉素B和阿奇霉素联合用药5μg/ml和10mg/ml，在体外作用8h时抑制作用明显。卡泊芬净和两性霉素B联合用药250μg/ml和5μg/ml，24h后有更明显的抑制作用。卡泊芬净和阿奇霉素联合用药250μg/ml和10㎎/ml在8h时，有更加明显的抑制杀伤作用。联合用药明显优于单独用药。对细胞杀伤效果佳。

目录

声明

第一章 前言

第二章 实验试剂与实验器材

2.1 主要试剂

2.2 实验器材

第三章 实验材料与方法

3.1 实验虫株棘阿米巴：

3.2 棘阿米巴培养液（PYG）的制备

3.3 棘阿米巴的培养与实验室分离

3.4 抗真菌药与抗生素联合应用在体外对棘阿米巴杀伤作用

3.5 统计学处理

第四章 结 果

4.1 正常棘阿米巴滋养体和包囊的形态特点

4.2 棘阿米巴形态的变化

4.3 对棘阿米巴细胞增殖的变化

第五章 讨论

结论

参考文献

致谢

附：综述:卡泊芬净临床应用的研究进展