亚麻籽对延边黄牛体组织脂代谢关键酶、调节因子及相关调控激素基因表达的影响

摘要

日粮中的多不饱和脂肪酸具有多种作用，参与反刍动物体内脂肪酸的合成代谢，并参与调控多种与脂代谢相关的酶和基因的表达。本试验旨在研究亚麻籽对延边黄牛背最长肌与皮下脂肪组织中与脂代谢相关的调节因子、关键酶、相关调控激素基因表达的影响。本试验选用30头体况相近、健康无病、体重为（480±15）kg的延边黄牛阉牛，采取单因子随机分为3组(n=10)，CON组（对照组）、WL组和CL组牛饲喂的育肥期基础日粮中分别添加0％亚麻籽、8％整粒亚麻籽、8％破碎亚麻籽。利用气相色谱仪检测延边黄牛背最长肌与皮下脂肪组织中长链脂肪酸的含量，利用实时荧光定量PCR技术检测背最长肌、皮下脂肪组织中与脂代谢相关的调节因子（SREBP1c，PPARγ，LXRα）、关键酶(SCD，ACC，FAS，LPL，C/EBPα，C/EBPβ，CPT1β)、相关调控激素(GHR，Ins R，GLNR，TNFa，Interleukin-6，Adiponectin)的基因表达，采用蛋白免疫印迹法检测皮下脂肪组织中与脂代谢相关调节因子（SREBP1c， PPARγ，LXRα）蛋白表达情况。试验结果表明:(1)日粮添加8％亚麻籽，能够提高延边黄牛脂肪组织和肌肉组织中n-3 PUFAs、n-6 PUFAs的含量，降低饱和脂肪酸（棕榈酸、硬脂酸）的含量;(2)脂肪组织中n3 PUFAs、n6 PUFAs含量的提高，能够促进延边黄牛皮下脂肪组织中参与脂代谢的转录因子SREBP-1C、PPARγ的基因表达和蛋白表达水平，且亚麻籽经破碎处理后影响更明显，脂肪组织中LXRα基因表达水平和蛋白表达也与亚麻籽破碎处理有关;(3)提高饲粮中n-3 PUFAs、n-6 PUFAs的含量有利于提高脂肪组织中脂肪酸合成关键酶类SCD、FAS、ACC、LPL的表达水平升高，对C/EBPα、C/EBPβ的影响效果低于关键酶类， n-3 PUFAs、n-6 PUFAs对脂肪组织中CPT1的提高高于肌肉组织;(4)亚麻籽的添加有利于提高脂肪组织中GHR、GLNR和细胞因子（Adiponectin、IL-6、TNFα）的基因表达水平，且脂肪组织中促进效果最明显，Ins R的表达与GLNR的表达趋势相反。综上所述:(1)延边黄牛日粮中添加8％的亚麻籽有利于提高背最长肌和皮下脂肪组织中C18∶1、C18∶2、C18∶2n-6、C18∶3n-3的含量，降低C16∶0、C18∶0的含量，经破碎处理的亚麻籽效果更好。(2)脂肪组织中n-3 PUFAs、n-6 PUFAs的提高，上调了延边黄牛皮下脂肪组织中转录因子SREBP-1c、PPARγ基因和蛋白表达水平，经破碎处理的亚麻籽影响更明显。(3)提高饲粮中亚麻籽的含量有利于提高脂肪组织中脂肪酸合成相关酶类(SCD、FAS、ACC、LPL)、相关调控激素(GHR、GLNR、TNFα、ADI、IL-6)基因表达水平。

目录

声明

摘要

第一章 前言

1．1 亚麻籽与不饱和脂肪酸

1．1．1 亚麻籽的生物学特性

1．1．2 不饱和脂肪酸在动物体内的代谢特性

1．1．3 亚麻籽在畜牧生产中的应用

1．2 脂代谢相关转录因子、关键酶及相关调控激素的国内外研究

1．2．1 调控关键基因表达的转录因子PPARγ、SREBP1c、LXRα

1．2．2 调控脂肪酸代谢关键酶(SCD，ACC，FAS，LPL，C／EBP α，C／EBP β，CPT1)

1．2．3 脂肪组织中脂肪酸代谢关键调控激素(GHR、Leptin、Ins R、GLNR、TNFα、IL-6、Adiponectin)

1．3 研究的意义与创新点

2．1 试验动物

2．2 试验设计及处理

2．3 样品的采集及处理

2．4 测定指标和方法

2．4．1 延边黄牛背最长肌脂肪组织和肌肉组织脂肪酸构成的测定

2．4．2 延边黄牛背最长肌脂肪组织、肌肉组织相关基因表达分析

2．4．3 延边黄牛背最长肌脂肪组织蛋白表达测定

2．5 数据处理

第三章 结果与分析

3．1 亚麻籽对延边黄牛组织中脂肪酸含量的影响

3．2 RNA完整性检验及扩增产物特异性

3．3．1 亚麻籽对延边黄牛脂肪组织与关键基因表达相关的调节因子(PPARγ、SREBP-1c、LXRα)基因表达的影响

3．3．2 亚麻籽对与延边黄牛脂肪组织中关键基因表达相关的调节因子(PPARγ、SREBP-1c、LXRα)蛋白表达影响

3．4 亚麻籽对延边黄牛脂肪组织脂肪酸合成关键酶SCD、FAS、ACC、LPL、C／EBPα、C／EBPβ、CPT1基因表达的影响

3．5 亚麻籽对延边黄牛组织与脂肪酸代谢关键调控激素GHR、InsR、GLNR、TNFα、ADI、IL-6基因表达的影响

第四章 讨论

4．1 亚麻籽对延边黄牛组织中脂肪酸构成的影响

4．2 亚麻籽对与关键基因表达相关的调节因子(PPARγ、SREBP-1c、LXR)基因和蛋白表达影响

4．3 亚麻籽对延边黄牛脂肪组织中脂肪酸合成关键酶SCD、FAS、ACC、LPL、C／EBPα、C／EBPβ、CPT1基因表达的影响

4．4 亚麻籽对延边黄牛脂肪组织与脂肪酸代谢关键调控激素GHR、Ins R、GLNR、IL-6、ADI、TNFα基因表达的影响

第五章 结论

参考文献

致谢

附录