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海带多糖和山柰酚对猪卵母细胞老化和早期胚胎发育的影响

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摘要

第一章绪论

1.1海带多糖(Lami narin,LAM)概述

1.2山柰酚(Kaempferol,KAE)概述

1.3猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎的体外培养及发育

1.4卵母细胞老化

1.5氧化应激和线粒体功能在卵母细胞体外培养和胚胎发育中的关系

1.6研究目的及意义

第二章海带多糖对猪老化卵母细胞的质量的影响

2.1.1试验药品和仪器

2.1.2药品的配制

2.1.3试验方法

2.2结果

2.2.1 LAM可以提高老化卵母细胞的质量和孤雌激活后囊胚率

2.2.2 LAM可缓解老化卵母细胞的氧化应激

2.2.3 LAM可增强老化卵母细胞的线粒体膜电位

2.2.4 LAM可降低猪卵母细胞组织蛋白酶B和caspase-3活性

2.3讨论

2.3.1 LAM减少老化卵母细胞内氧化应激

2.3.2 LAM增强老化卵母细胞内线粒体膜电位

2.3.3 LAM降低老化卵母细胞内凋亡水平

2.4本章小结

第三章海带多糖对猪早期胚胎的发育的影响

3.1材料与方法

3.1.1试验药品和仪器

3.1.2药品的配制

3.1.3试验方法

3.2结果

3.2.1 IVC期间添加LAM对猪早期胚胎发育能力的影响

3.2.2 LAM增强了猪早期胚胎的抗氧化能力

3.2.3 LAM可改善猪早期胚胎的线粒体功能

3.2.4 LAM对4细胞胚胎和囊胚基因表达的影响

3.3讨论

3.3.1 LAM提高早期胚胎发育率

3.3.2 LAM减少胚胎内氧化应激水平

3.3.3 LAM提高胚胎内线粒体膜电位水平

3.3.4 LAM提高胚胎内促胚胎发育基因的转录水平

3.4本章小结

第四章山柰酚对猪老化卵母细胞质量的影响

4.1材料与方法

4.1.1试验药品和仪器

4.1.2药品的配制

4.1.3试验方法

4.2结果

4.2.1 KAE能有效延缓卵母细胞老化并促进胚胎发育

4.2.2 KAE可降低老化卵母细胞的氧化应激

4.2.3 KAE可增强老化卵母细胞的线粒体膜电位

4.2.4 KAE可降低猪老化卵母细胞发育成囊胚后的细胞凋亡指数

4.3讨论

4.3.1 KAE缓解细胞老化并提高胚胎全能性基因表达

4.3.2 KAE减少老化卵母细胞氧化应激

4.3.3 KAE提高老化卵母细胞线粒体膜电位

4.3.4 KAE减少老化卵母细胞凋亡

4.4本章小结

第五章山柰酚对H2O2诱导氧化损伤猪胚胎发育的影响

5.1材料与方法

5.1.1试验药品和仪器

5.1.2药品的配制

5.1.3试验方法

5.2结果

5.2.1不同浓度KAE对猪胚胎体外发育的影响

5.2.2 KAE缓解H2O2诱导的ROS的升高

5.2.3 KAE减弱猪胚胎中H2O2诱导的线粒体功能障碍

5.2.4 KAE可以缓解H2O2诱导的自噬

5.2.5 KAE缓解H2O2诱导的DNA损伤

5.3讨论

5.3.1 KAE促进猪胚胎早期发育

5.3.2 KAE缓解H202引起的氧化应激

5.3.3 KAE缓解H202引起的线粒体膜电位升高

5.3.4 KAE缓解H202引起的自噬水平升高

5.3.5 KAE缓解H202引起的凋亡水平升高

5.4本章小结

第六章结论

参考文献

致谢

附录

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