声明
摘要
前言
1.CD4、CD8分子的概述
1.1 CD4、CD8分子简介
1.2 T淋巴细胞简介
2.CD4、GD8分子特性
2.1 CD4分子特性
2.2 CD8分子特性
3.不同种类聚合酶链式反应之间的比较
3.1普通聚合酶链式反应
3.2荧光聚合酶链式反应技术
4.试验研究目的与意义
1材料
1.1实验动物
1.2主要试剂
1.3试验主要仪器及设备
1.4实验室配制溶液
2.方法
2.1引物的设计与合成
2.2细胞中mRNA的提取
2.3 mRNA的反转录
2.4延边白鹅CD4、C08基因的克隆
2.6延边白鹅CD4、CD8基因的TA克隆
2.7转化
2.8克隆质粒的提取及鉴定
2.9 CD4、CD8的生物信息学分析
2.10阳性标准质粒的制备
2.11 CD4、CD8荧光定量PCR方法的建立反应体系及条件的优化
结果
1.延边白鹅CD4、CD8基因的扩增
2.延边白鹅CD4、CD8核苷酸组分分析及核苷酸序列同源性分析
3.延边白鹅CD4、CD8基因组的氨基酸序列同源性分析
4.延边白鹅GD4、OD8蛋白的三级结构预测
5.阳性标准质粒的制备
6.溶解曲线
7.荧光定量PCR标准曲线的建立
8.敏感性试验
8.1荧光定量PCR的敏感性检测
8.2普通PCR的敏感性检测
9.重复性试验
讨论
结论
参考文献
致谢
作者简介
附录