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用于免疫分析的聚苯乙烯微孔板功能化的研究

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第一章 绪论

§1.1引言

§1.2国内外标记免疫分析技术研究现状

§1.3时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的系统介绍

§1.4时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的应用

§1.5用于TRFIA检测样品池研究概况

§1.6本次实验研究的目的与意义

第二章 实验试剂与仪器

§2.1试剂

§2.2仪器

第三章 固相白色不透明尼龙膜聚苯乙烯微孔板的制备

§3.1实验方法

§3.2实验结果与讨论

3.2.1溶解尼龙-6活化剂的比较研究

3.2.2尼龙-6膜聚苯乙烯微孔板的制备条件及优化

§3.3小结

第四章 尼龙膜聚苯乙烯微孔板功能化研究

§4.1I125标记乙肝抗原HBSAE研究

§4.2最佳功能化条件的选择研究

§4.3最佳功能化条件的优化研究

§4.4功能化原理研究

第五章 功能化微孔板反光、荧光性能研究与检测

§5.1功能化微孔板反光、荧光性能测试

§5.2.功能化聚苯乙烯微孔板荧光检测

§5.2小结

第六章 结论

致谢

参考文献

附录

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摘要

为满足固相时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)研究需要,采用固相载体改进技术研制用于检测系统的聚苯乙烯微孔板,不仅提高TRFIA系统的灵敏度,而且可以把该技术应用到其他免疫分析技术、生物芯片技术、污水处理、发酵工艺、酶工程和亲和层析,具有重要的现实意义。 本文将聚苯乙烯微孔板内表面固相功能化,研制一种在聚苯乙烯微孔板内表面形成耐受强酸、强碱、有机溶剂的尼龙-6膜层,并在膜层表面烷基化得到活性基团与己二酸二酰肼进行“手臂”连接,用双功能基团戊二醛活化,活化后的膜层与蛋白质具有很高的连接性能和稳定性。检测结果表明,经修饰的聚苯乙烯微孔板化学连接蛋白质结合率比物理吸附高出5~10倍,在-4℃环境中存放6个月活性降低小于15%。灵敏度和稳定性显著提高。 本文制备的功能化聚苯乙烯微孔板具有使用方法简便、快捷、污染小、成本低的特点,有广阔的应用前景。

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