桉叶粗提物脂肪酸成分及抗菌、抗氧化试验研究

摘要

桉树属于桃金娘科植物，是一种具有多种经济效益的优良经济树种。桉叶有机粗提物主要包括桉叶油腺细胞分泌的芳香精油及桉叶合成的甘油三酯。桉叶芳香油是目前世界上从树叶类提取的各类天然精油中数量最多的一种，也是我国重要的出口香料之一，而且在国际芳香油市场上桉叶油占有非常重要的地位。随着人们对天然香料的需求不断提高，国际上对桉叶油的需求量也越来越大，因此需加强对桉叶粗提物的开发和基础研究。桉叶中还含有一定的甘油三酯和种类丰富的脂肪酸，脂肪酸具有很重要的生理功能。本研究以广东湛江市南方种苗基地栽植的主要桉树树种为研究对象，研究了桉叶油脂的提取、脂肪酸化学成分分析及桉叶油抗菌抗氧化的活性研究，并系统研究分析了桉叶油脂肪酸资源分布情况。主要研究内容及结果如下:
　　 1.以尾巨桉为试材，应用索氏抽提法和超声波抽提法分别提取桉叶油脂，并对桉叶油脂中脂肪酸成分进行分析。结果证明两种方法提取的桉叶油脂其脂肪酸的成分完全一致，均为十四酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、亚油酸、α-亚麻酸，且主要成分含量均为α-亚麻酸＞棕榈酸＞亚油酸。
　　 2.以尾赤桉为试材，经过反复试验，筛选出桉叶油脂提取的最优条件为:丙酮作为溶剂，物料粒度为0.075～0.150mm，料液比为1∶15(g∶ml)，浸泡时间为8h，萃取时间为1.5h，桉叶油脂得率均在10％以上。
　　 3.研究结果表明，GC-MS色谱条件对脂肪酸分析检测影响显著。筛选出最优GC-MS的色谱条件条件为:初始温度80℃，第一次保留时间1.1min、第一升温速率17℃/min，中间温度240℃，第二次保留时间0.7min，第二升温速率1℃/min，最后温度253℃，最后保留时间4min。
　　 4.应用超声波抽提取法提取来源不同的桉树树种的桉叶油脂，结果表明，不同桉树树种桉叶油脂的脂肪酸成分和含量存在明显差异;林龄较大、中部位置的老叶比林龄较小、下部和顶部幼叶的脂肪酸含量更为丰富。经GC-MS分析得到不饱和脂肪酸:亚油酸和亚麻酸的含量平均达到48.17％，其中尾巨桉G9中亚油酸和亚麻酸的含量最大，达到67.85％;饱和脂肪酸中棕榈酸含量平均达到27.19％，其中尾赤桉SH48相对含量最大为34.28％;而根据标准品分析得到的10g干桉叶中尾巨桉EC95的不饱和脂肪酸亚油酸和亚麻酸的含量最大，达到74.71mg，饱和脂肪酸中棕榈酸的含量为59.53mg，硬脂酸的含量为6.33mg。总体来说，桉叶中脂肪酸含量较丰富。
　　 5.采用刃天青指示剂法测定不同桉树物种、不同浓度的粗提物对农杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌的抑菌活性，结果表明，不同桉树物种和不同浓度的的粗提物对不同细菌的抑制作用存在明显差异，其中桉树物种（或品系）是主要影响因素，其次是浓度，再次是菌种。不同桉树树种的桉叶粗提物的抑菌活性大小依次为WC3＜EC95＜SW48＜SH48＜EC90＜EC85;随着浓度的增大，尾巨桉桉叶粗提物的抑菌效果有明显的增强;尾巨桉粗提物对金黄色葡萄球菌具有抑菌效果，大肠杆菌抑菌效果比较弱、农杆菌无抑菌作用。
　　 6.采用DPPH自由基离子清除法对不同的桉叶粗提物的抗氧化能力进行评价分析，结果发现，桉叶粗提物具有很强的抗氧化能力。来源不同的桉叶粗提物的抗氧化能力表现为柳桉、粗皮桉、巨桉及G9具有很强的抗氧化活性，对DPPH自由基离子清除率几乎达到100％，尾巨桉系列的EC90、EC85、尾巨桉3年生顶部以及赤桉5/11、雷林11、赤桉3/11、邓恩桉、SW48、SH48、T54较次之，也能达到95％以上，3229、EC95、WC3、大花序桉、尾巨桉1年生中部、尾巨桉3年生中部及尾巨桉2年生中部最差，也在90％左右。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 桉树概述

1．2 桉叶油的概述

1．3 桉叶油化学成分的研究

1．3．1 挥发性成分

1．3．2 非挥发性成分

1．4 桉叶油的生物活性研究

1．4．1 桉叶油的抗菌活性研究

1．4．2 桉叶油的抗氧化活性研究

1．5 桉叶油的提取

1．5．1 水蒸气蒸馏法

1．5．2 浸提法

1．5．3 压榨法

1．5．4 其他方法

1．6 脂肪酸

1．6．1 脂肪酸组成与分类

1．6．2 脂肪酸的理化性质与成分分析

1．6．3 油脂和脂肪酸的提取

1．7 桉叶油脂肪酸概述

1．8 研究的目的与意义

2 桉叶油脂肪酸的提取及成分分析研究

2．1 实验材料

2．2 实验试剂与仪器

2．2．1 实验试剂

2．2．2 实验仪器

2．3 实验方法

2．3．1 不同提取方式对桉叶脂肪酸成分影响

2．3．2 桉叶油的提取条件优化研究

2．3．3 桉叶脂肪酸提取成分的GC-MS优化分析

2．3．4 不同来源桉叶脂肪酸成分比较分析

2．3．5 定性与定量分析

2．4 结果与分析

2．4．1 棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸的定量分析

2．4．2 索氏抽提法和超声波抽提法对的桉叶粗脂脂肪酸成分的影响

2．4．3 桉叶粗提物提取条件的优化

2．4．4 成分分析GC-MS条件优化

2．4．5 来源不同的桉叶粗提物脂肪酸成分分析

2．5 小结

3 桉叶粗提物抗菌活性研究

3．1 测试菌种

3．2 实验试剂及仪器

3．3 实验方法

3．3．1 不同浓度、不同树种的桉叶粗提物生物活性研究

3．3．2 尾巨桉桉叶粗提物的抗菌活性研究

3．4 实验结果与分析

3．4．1 不同浓度的桉叶粗提物活性研究

3．4．2 不同桉树树种桉叶油的生物活性比较

3．4．3 桉叶粗提物的脂肪酸成分与生物抑菌活性关系比较

3．4．4 尾巨桉粗提物的抑菌效果

3．5 小结

4 桉叶粗提物抗氧化活性研究

4．1 实验试剂及仪器

4．2 实验方法

4．3 数据分析

4．4 实验结果与分析

4．5 小结

5 结论与创新点

5．1 结论

5．2 创新点

参考文献

攻读学位期间的主要学术成果

致谢