PXR基因变异及其与激动药St.John's Wort对CYP450酶活性影响

摘要

St John′s wort为金丝桃属植物提取物,对轻中型以及某些重型抑郁症具有很好疗效.无显著不良反应,被誉为天然氟西汀.该药在民间已有2000多年的使用历史.作为一种传统的天然药物,St.John′s wort一直被当作安全有效药物广泛应用.然而,自1998年以来,临床陆续发现,由于药物代谢和转运的诱导,St.John′s wort和华法令、环孢霉素、口服避孕药等多种药物合并治疗时往往出现药物相互作用,导致严重不良反应.2000年,Moore LB等首次发现,St John′s wort为Pregnane X Receptor(PXR)受体激动剂.PXR是1998年以来人们得以功能确定的新的孤核受体.PXR参与CYP3A4、ABCB1(MDR1)等代谢与转运蛋白基因表达调控,还对胆汁新陈代谢也具有重要调节作用.是机体感知并调动对外源性物质进行有效处置的重要枢纽.根据PXR受体研究的相关体外实验结果以及其配体St John′s wort在临床引发药物相互作用情况,St John's wort被普遍认为对多种P450酶活性具有调控作用.然而,该课题立项时,此方面尚无体内系统研究.就此,我们开始研究St John's wort对体内P450酶活性影响.由此观察PXR受体激活后的P450酶活性的整体变化情况.为进一步探讨St John's wort对CYP2C19酶活性诱导作用的临床意义,课题选取了奥美啦唑作为代表,采用同样的临床试验方案,观察了st john's wort和CYP2C19底物药物合并治疗时,St John's wort对奥美啦唑及其代谢产物药代动力学的影响.结果发现,服用St John's Wort两周后,CYP2C19催化生成的产物5羟奥美拉唑的Cmax和AUC仅在2C19野生基因受试者中分别增加50％和45％,而在2C19突变基因型中无显著改变.由此进一步证实st john's wort对CYP2C19酶活性的诱导,且其效应表现出基因型依赖性.实验还发现,和其他文献报道一致,st john's wort对CYP3A4酶活性具有显著诱导作用.其代谢产物奥美拉唑砜在CYP2C19强、弱代谢基因型受试者中的C<,max>分别增加160.3±45.5％和1 55.5±58.8％,AUC分别增加136.6±84.6％与158.7±101.4％.由于st john's wort对酶活性诱导所导致的代谢加速作用,母药奥美拉唑体内治疗浓度显著降低.强代谢和弱代谢基因型组中峰浓度分别降低37.5±13.3％(p<0.05)和49.6±20.7％(p<0.05);血药时间曲线下面积分别降低37.9±21.3％和43.9±23.7％.这样程度的改变显然会导致奥美啦唑治疗失败或治疗补充分.因此,临床上同时应用这两种药物进行治疗时,应相应调整奥美拉唑的给药剂量.在查明PXR受体激动药St John's Wort对P450酶活性影响及其临床意义阐述的同时.我们注意到,受试者个体酶活性的诱导性具有显著个体差异.这种诱导性个体差异可能由PXR基因遗传多态性所决定.为验证这一假设的合理性,我们展开了PXR基因变异研究.根据PXR基因序列,我们从4外显子上游以及7外显子下游设计4.3 kb片断PCR引物对.同时,收集并提取了98例DNA标本,对它们进行PXR扩增.经过纯化.对4、6及7外显子及附近内含子片断进行测序和分析.

目录

文摘

英文文摘

原创性声明及关于学位论文使用授权说明

第一章 PXR激动药St John's Wort对CYP2C19体内酶活性的影响

摘要

ABSTRACT

研究背景

研究方法

研究结果

讨论与总结

第二章PXR激动药St john's wort对CYP2C19底物奥美啦唑及其代谢产物药代动力学的影响

摘要

ABSTRACT

研究背景

研究方法

实验结果

讨论与总结

第三章 孤核受体PXR基因变异研究

摘要

ABSTRACT

研究背景

研究方法

实验结果

讨论与总结

参考文献

综述：孕激素受体PXR的研究进展

摘要

ABSTRACT

PXR受体的发现

PXR受体的空间构象

PXR受体与基因调控元件

PXR受体的配体物质

PXR受体的组织表达

PXR受体的功能

PXR受体与胆汁酸的代谢

PXR受体与CYP3A4的诱导

PXR受体与临床药物治疗

PXR受体基因多态性

总结与展望

参考文献

致谢

攻读学位期间主要的研究成果