铜绿假单胞菌质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶耐药性的分子生物学研究

摘要

本文研究了铜绿假单胞菌质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶的耐药性，检测了AmpC酶并鉴定其基因表型，为临床抗生素的合理使用提供实验室依据。文章在收集临床分离的108株铜绿假单胞菌中，产AmpC酶铜绿假单胞菌28株，产AmpC酶株对多种抗生素耐药，且新发现一株产质粒介导的CMY-7型AmpC酶铜绿假单胞菌株。研究证实，铜绿假单胞菌对多种抗生素耐药；铜绿假单胞菌存在产质粒介导AmpC酶；产AmpC酶是铜绿假单胞菌对多种抗生素产生耐药的重要机制；通过序列比较，国内首次在铜绿假单胞菌中发现一株产质粒介导的CMY-7型AmpC酶菌株。

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文摘

英文文摘

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第一章前言

第二章材料与方法

2.1材料

2.1.1标本来源

2.1.2主要仪器

2.1.3主要试剂

2.2 方法

2.2.1标本筛选(K-B药敏纸片法)

2.2.2 AmpC酶的制备

2.2.3三维试验(头孢西丁)

2.2.4质粒抽提、电泳、纯化

2.2.5 PCR扩增试验

2.2.6 PCR产物测序

2.2.7测序结果同源性比较

第三章结果

3.1三维实验

3.2耐药表型

3.3质粒DNA电泳

3.4质粒DNA纯化电泳

3.5 PCR扩增产物

3.6 PCR产物测序

3.7同源性比较

第四章讨论

第五结论

参考文献

综述

1起源、命名与分组

2.AmpC酶的生化特征

3.AmpC的基因结构，作用

4.AmpCβ-内酰胺酶表达调控

5.AmpC酶与其它对β-内酰胺抗生素耐药表型的区别

6底物特征

7AmpCβ-愉酰胺酶抑制剂

8功能结构的研究

参考文献

表1质粒AmpC种类

致谢

攻读学位期间主要的研究成果