健胃愈疡颗粒抗消化性溃疡复发的作用及其抗炎机制的研究

摘要

目的：通过临床研究和动物实验观察健胃愈疡颗粒(简称JWYY)抗消化性溃疡(Peptic Ulcer，PU)复发的作用，并观察其对PU愈合和复发过程中胃黏膜炎症及核因子κB(Nuclear Factor-kappa B，NF-κB)、β-防御素-2表达的影响，以期从炎症角度揭示JWYY抗PU复发作用的机制。 方法： 1．临床研究：经胃镜和组织学及尿素酶检查证实幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)阳性的PU且中医辨证属肝郁脾虚型的患者50例，随机分为健胃愈疡颗粒试验组(简称JWYY组)和西药对照组各25例；另取Hp阴性PU患者17例设为Hp阴性PU对照组；胃镜及组织学均大致正常且Hp阴性者8例设为健康对照组。JWYY组服健胃愈疡颗粒剂3g/∥次，3次／d，连服6w。西药对照组服灭滴灵0.4g bid，阿莫西林1.Og bid，连服7d；奥美拉唑肠溶片20mgbid，连服6w。两组停药后4w复查胃镜，进行胃镜疗效、Hp根除率、证候疗效及生活质量评定，两次胃镜检查时均取胃窦黏膜行苏木素．伊红(HE)染色、免疫组化、免疫印迹(Western blot)、原位杂交检查，观察胃窦炎症程度、检测NF-κBp65、β-防御素-2蛋白及mRNA表达。对溃疡愈合的患者进行随访，统计PU一年复发率。Hp阴性PU对照组及健康对照组不作治疗和复查，只取一次标本行上述检查。 2．动物实验：将116只大鼠随机分为5组，即正常对照组(18只)、假手术对照组(18只)、模型组(32只)、JWYY组(24只)，奥美拉唑对照组(24只)。采用改良Okabe乙酸涂抹法复制实验性胃溃疡模型，正常对照组不造模，假手术对照组以生理盐水代替乙酸，造模后24h，JwYY组、奥美拉唑对照组分别灌胃JWYY和奥美拉唑药液，量分别为0.08lg、0.36mg／lml／100g体重，其余各组灌服蒸馏水，量均为lml／100g体重，每天1次。造模第90d，再将模型组大鼠随机分为模型组和模型复发组，腹腔注射白细胞介素-1β(interleukin-lβ， IL-lβ)(lμg／kg体重)复制胃溃疡复发模型，模型组以生理盐水代替IL-lβ。分别于造模第8d、16d、92d(即复发溃疡诱导后48h)均分3批处死各组大鼠，剖腹取胃，在观察胃大体情况、对胃溃疡指数(Gastric ulcer index，GUI)进行检测后，剪取胃窦部含溃疡的(无溃疡者在相应部位取材)胃组织行HE染色观察组织学改变，免疫组化、免疫印迹、原位杂交检测NF-kBp65、β-防御素-2蛋白及mRNA表达。 结果： 1．临床研究：①．JWYY组完成6w治疗和复查者24例，胃镜观察临床痊愈12例，显效7例，有效4例，无效1例；Hp根除11例，根除率为45.8％；中医证候观察临床痊愈lO例，显效8例，有效4例，无效2例；PU疾病量表分值较治疗前显著提高。与西药对照组比较，胃镜疗效无显著差别(P>0.05)，Hp根除率较低(P<0.05)，而中医证候和生活质量改善优于西药对照组(均P<0.05)；②JWYY组完成1年随访者16例，复发1例，复发率6.25％；西药对照组完成1年随访者15例，复发l例，复发率为6.67％。两组一年复发率比较无显著差别(P>0.05)。③．Hp阳性PU患者胃窦慢性炎症和活动性程度较Hp阴性PU对照组显著增强，JWYY能显著减轻Hp阳性PU患者胃窦慢性炎症和活动性程度(分别P<0.01、P<0.05)，与西药对照组比较无显著差别(均P>0.05)。④．NF-KBp65mRNA和蛋白表达有失活和活化两种状态，Hp阳性PU患者胃黏膜NF-KBp65tuRNA和蛋白激活，表达水平较Hp阴性PU对照组和健康对照组显著上调(均P<0.01)，经JWYY和西药治疗后均较治疗前显著下调(均P<0.01)，JWYY组和西药对照组之间比较无显著差别(均P>0.05)；NF-KBp65mRNA和蛋白表达与胃窦慢性炎症和活动性程度均呈正相关(均P<0.01)。⑤．β-防御素-2mRNA和蛋白在健康对照组胃黏膜无明显表达，在Hp阴性PU对照组少量表达，而Hp阳性PU患者表达显著上调(均P<0.01或0.05)，主要位于胃黏膜表层上皮细胞胞浆。经JWYY和西药治疗后均较治疗前显著下调(P<0.01或0。05)，JWYY组和西药对照组之间比较无显著差别(均P>0。05)；β-防御素-2mRNA和蛋白表达与胃窦慢性炎症和活动性程度均呈正相关(均P<0.01)。⑥．NF-κBp65mRNA和蛋白表达与β-防御素-2rnRNA和蛋白表达均呈正相关(均P<0.01)。 2．动物实验：①．胃溃疡造模第8d，经乙酸造模的各组大鼠胃黏膜肉眼观察和组织学检查均可见到溃疡病灶，但溃疡程度不一，模型组GUI最高，JWYY组、奥美拉唑对照组GUI均显著低于模型组(P<0.01或0.05)。16d，除模型组3只见浅小溃疡外，其余各组大鼠溃疡均已愈合，JWYY组和奥美拉唑对照组愈合溃疡组织形态学表现优于模型组。92d，模型复发组、JWYY组、奥美拉唑对照组复发率分别为87.5％、12.5％、25％，后二者与前者比较有显著性差异(均P<0.01)。JWYY组和奥美拉唑对照组所见再生黏膜较厚，修复较完全，排列较整齐。②8d、16d模型组、92d模型复发组溃疡边缘或再生黏膜慢性炎症细胞和中性粒细胞密度均显著高于正常和假手术对照组(均P<0.01)，JWYY组、奥美拉唑对照组均较同期模型组或模型复发组显著减低(P<0.01或0.05)。慢性炎症细胞和中性粒细胞密度与GUI、溃疡复发呈正相关，与愈合呈负相关。③正常和假手术对照组NF-κzBp65mRNA和蛋白呈失活状态；8d、16d模型组、92d模型复发组溃疡边缘或再生黏膜NF-κzBp65mRNA和蛋白激活，表达较正常和假手术对照组显著上调(均P<0.01)，JWYY组和奥美拉唑对照组表达均较同期模型组或模型复发组显著减低(P<0.01或0.05)。NF-κzBp65mRNA和蛋白表达与慢性炎症细胞密度、中性粒细胞密度均呈正相关(均P<0.01)。④β-防御素-2mRNA和蛋白在正常和假手术对照组大鼠胃黏膜表层上皮细胞有表达，8d模型组、JWYY组和奥美拉唑对照组溃疡边缘均无明显表达。16d模型组、92d模型复发组表达显著高于正常和假手术对照组(P<0.01或0.05)，JWYY组和奥美拉唑对照组表达均较同期模型组或模型复发组显著下调(P<0.01或0.05)；β-防御素-2mRNA和蛋白表达与慢性炎症细胞密度、中性粒细胞密度均呈正相关(均P<0.01)，与NF-κBp65mRNA和蛋P白表达呈正相关(均p<0.01)。 结论： 1．JWYY能显著改善肝郁脾虚型Hp阳性PU患者生活质量。JWYY能有效的促进PU愈合，改善溃疡愈合质量，具有抗溃疡复发作用。 2．NF-KB激活后诱导β-防御素-2的过度表达，导致胃黏膜炎症反应，这可能是影响PU愈合及其愈合质量并导致Pu复发的机制之-o3．JWYY可能通过抑制NF-κB的激活，下调β-防御素-2的过度表达，从而发挥抗炎作用，这可能是其抗溃疡复发机制之一。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:本文主要英汉缩略名词对照表

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技术路线

前言

第一部分JWYY对肝郁脾虚型Hp阳性PU患者胃窦炎症程度及NF-κBp65、β-防御素-2表达的影响

第二部分JWYY对乙酸性胃溃疡及其复发模型大鼠胃组织炎症细胞密度及NF-κBp65、β-防御素-2表达的影响

讨论

结论

参考文献

附表

附图

综述

攻读学位期间的主要研究成果

致谢