高血压脑出血肝阳化风证患者血清双向凝胶电泳图谱建立及质谱分析

摘要

目的 利用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分离高血压脑出血肝阳化风证、高血压病肝阳上亢证及健康对照血清总蛋白，建立高血压脑出血肝阳化风证、高血压病肝阳上亢证及健康对照血清蛋白质组表达图谱。比较3组血清蛋白质组的差异表达，对差异表达的蛋白质进行质谱分析和数据库搜索，初步确定高血压脑出血肝阳化风证血清中差异表达的蛋白质，为进一步阐明中医肝阳化风证的本质奠定基础。 方法 高血压脑出血肝阳化风证组、高血压病肝阳上亢证组及健康对照组血清均以试剂盒去除白蛋白及IgG，以BCA法测血清蛋白浓度。以双向凝胶电泳分离各组血清蛋白质，考马斯亮蓝染色使凝胶中的蛋白质点可视化。扫描凝胶成像，以PDQuest软件对高血压脑出血肝阳化风证、高血压病肝阳上亢证及健康对照血清蛋白质组表达图谱进行差异分析，选定差异点进行MALDI-TOF质谱分析。Mascot 软件搜索 MSDB 和SMISS-PROT数据库鉴定蛋白质。 结果 1．建立高血压脑出血肝阳化风证、高血压病肝阳上亢证及健康对照血清蛋白质组表达图谱。 2.发现8个蛋白质点在高血压脑出血肝阳化风证血清中出现异常表达，7个蛋白质点在高血压病肝阳上亢证血清中出现异常表达。初步鉴定其中的5个蛋白质：血清淀粉样前体蛋白(serum amyloidprotein precursor)，铜蓝蛋白(ceruloplasmin)，维生素D结合蛋白(Ⅵtamin D-Binding Protein)，载脂蛋白C-Ⅲ(apolipoprotein C-Ⅲ)和转铁蛋白(transferrin)。 结论 1．建立了高血压脑出血肝阳化风证、高血压病肝阳上亢证及健康对照血清蛋白质组表达谱。 2．血清淀粉样前体蛋白、铜蓝蛋白、维生素 D 结合蛋白、载脂蛋白C-Ⅲ和转铁蛋白在高血压脑出血肝阳化风证发病过程中出现异常表达。

目录

文摘

英文文摘

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前言

第一章应用双向凝胶电泳分离高血压脑出血肝阳化风证患者、高血压病肝阳上亢患者和健康对照血清蛋白质

第二章质谱分析

第三章讨论

第四章结论

第五章附录

参考文献

脑血管疾病中医“证”实质的现代研究方法和蛋白质组学在“证”实质研究中的应用

致谢

在校期间科研成果及发表论文