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5-氮杂胞苷对人角质形成细胞增殖及诱导型一氧化氮合酶表达的影响

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前言

第一章材料和方法

第二章结果

第三章讨论

第四章结论

参考文献

综述 DNA甲基化与皮肤

致谢

攻读学位期间主要的研究成果

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摘要

目的:观察5-氮杂胞苷(5-azaC)对人角质形成细胞增殖及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,并初步探讨甲基化状态与iNOS表达的关系。 方法:原代培养人角质形成细胞,用浓度为1 μM的5-azaC处理细胞24h,72h和120h,对照组细胞以PBS处理。通过MTT实验观察细胞增殖活性的差异,RT-PCR及Western Blot分别检测iNOS mRNA和蛋白的表达情况。 结果: 1.由MTT法绘制细胞生长曲线,1 μM 5-azaC处理后人角质形成细胞与对照组相比生长速度减慢; 2.所有对照组及1 μM 5-azaC处理后24h人角质形成细胞均未检出iNOS mRNA/蛋白表达;1 μM 5-azaC处理后72h和120h人角质形成细胞有iNOS mRNA/蛋白表达,且120h表达量强于72h(P<0.05)。 结论: 5-azaC可能通过降低人角质形成细胞iNOS基因甲基化水平,从而导致其表达,进而抑制细胞增殖。

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