早期应激对成年大鼠伏隔核多巴胺受体2基因表达的影响

摘要

目的：研究出生早期应激（母爱剥夺）对大鼠成年后脑内伏隔核多巴胺受体2（DRD2）基因表达的影响，探索DNA甲基化是否参与调控DRD2基因的表达。 方法：30只新生大鼠被随机分为应激组（16只）和对照组（14只），母爱剥夺组大鼠于哺乳期每天接受6小时母爱剥夺，对照组大鼠不接受任何处理。12周龄时，采用Morris水迷宫实验评估大鼠空间学习记忆能力，检测早期应激模型制作是否成功。采用实时荧光定量PCR检测伏隔核DRD2受体及DNA甲基化转移酶mRNA表达水平，采用亚硫酸法处理基因组DNA，T载体克隆质粒测序检测DRD2基因启动子区DNA甲基化水平。 结果：⑴在Morris水迷宫试验中，应激组大鼠逃避潜伏期时间即寻找平台所花的时间显著长于对照组；穿越平台次数及目标象限停留时间显著少于对照组大鼠。⑵在实时荧光定量PCR实验中，应激组大鼠成年后脑内伏隔核中DRD2基因表达显著低于对照组大鼠；应激组大鼠脑内伏隔核中Dnmt1基因、Dnmt3a基因表达与对照组大鼠相比较，差异无统计学意义；Dnmt3b在神经系统表达过低，两组大鼠伏隔核中均无法检测。⑶质粒测序表明应激组大鼠伏隔核DRD2基因启动子区DNA甲基化水平与对照组大鼠DRD2基因DNA甲基化水平相比较，差异无统计学意义。 结论：①早期应激导致大鼠成年后空间学习记忆能力下降。②早期应激导致大鼠多巴胺系统DRD2基因在伏隔核中的表达减少。③DNA甲基化可能不参与调控DRD2基因的表达。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

第一章 前言

第二章材料与方法

2.1 研究对象

2.2仪器设备与试剂

2.3实验方法

2.4数据分析

第三章结果

3.1两组大鼠空间学习记忆能力比较

3.2两组大鼠real-time PCR检测结果比较

3.3两组大鼠伏隔核多巴胺受体基因DNA甲基化水平比较

第四章讨论

第五章结论

参考文献

综述：早期经历影响个体成年后行为的表观遗传学机制

致谢

攻读学位期间主要研究成果