精子蛋白质AKAP4、GAPDHS和SPANX与A23187诱地顶体反应率在人工授精中的临床应用价值

摘要

第一章不同生育能力供精者精子蛋白AKAP4、GAPDHS和SPANX的差异表达研究
　　 目的：
　　 从蛋白质水平探讨不同生育能力供精者精子蛋白的改变，寻找几种与供精者精子生育能力相关的可能蛋白质标志物，为更好地筛查供精者提供新的指标。
　　 材料和方法：
　　 收集在精子库里连续做12个不同受者的AID周期治疗一次也未成功的供精者的精液（低生育组）、AID成功率在20％-30％之间的的供精者的精液（正常对照组）和AID成功率在50％以上的供精者的精液（高生育组），各10人，每人捐献3次。
　　 运用CASA分析精子活力，Percoll密度梯度离心技术分离纯化精子，RIPA裂解结合超声法提取蛋白，BCA试剂盒测定蛋白浓度，SDS-PAGE电泳技术分离不同生育能力供精者精子标本的总蛋白质，结合荧光免疫、Western blotting技术筛选差异蛋白质。
　　 结果：
　　 随着供精者生育能力的下降，精子中AKAP4、GAPDHS和SPANX这三种蛋白表达减少，且差异蛋白质大多与精子活力有关。
　　 结论：
　　 综上所述，供精者生育能力与精子蛋白质差异表达有关，主要差异蛋白AKAP4、GAPDHS和SPANX可作为评估男性生育能力的生物标志物,精子的活动力可能与男性生育能力有关。
　　 第二章 A23187诱发顶体反应率在宫腔内人工授精中的临床应用价值
　　 目的：
　　 探讨精子顶体反应(AR)与宫腔内人工授精(IUI)临床妊娠率的关系，以期指导IUI临床工作。
　　 材料和方法：
　　 以我院2010年1月～2010年12月接受IUI治疗的128例患者为研究对象，Percoll密度梯度离心技术分离纯化精子，模拟生理情况下精子进入女性生殖道后的顶体反应，在体外用Ca2+载体A23187诱发AR，FITC-PSA荧光染色，最后在荧光显微镜下观察，计算自发AR率和诱发AR率，收集临床资料，SPSS统计学处理实验数据，分析精子AR率与IUI临床妊娠率的关系。
　　 结果：
　　 1、妊娠组与非妊娠组相比，自发AR率在统计学上无显著性的差异（P＞0.05），诱发AR率在统计学上有显著性的差异（P＜0.05）；
　　 2、诱发AR率≤20％、20％～50％和≥50％三组相比，其IUI临床妊娠率在统计学上有显著性的差异(4.8％vs12.5％vs18.6％，P＜0.05)。
　　 结论：
　　 自发AR率与IUI临床妊娠率无关，诱发AR率与IUI临床妊娠率有关；诱发AR率≥50％时，可进行IUI，诱发AR率在20％～50％之间时，可进行IUI或IVF，诱发AR率≤20％时，可进行ICSI。

目录

文摘

英文文摘

中英文缩写对照

实验技术路线图

前言

第一章 不同生育能力供精者精子蛋白AKAP4、GAPDHS和SPANX的差异表达研究

1 实验材料和实验方法

2 实验结果

3 讨论

4 结论

第二章 A23187诱发顶体反应率在宫腔内人工授精中的临床应用价值

1 实验材料和实验方法

2 结果

3 讨论

4 结论

参考文献

综述 精子差异蛋白质组学：深入了解，挑战和展望

参考文献

致谢