Novaferon对LPS介导的单核细胞分泌TNF-α及其相关信号因子的影响以及对克軳恩病患者疗效观察

摘要

目的:观察Novaferon在体外对LPS介导的克罗恩病患者单核细胞分泌TNF-α的影响及其相关信号分子TRAF-6、JNK、p38、ERK、NF-κB、IRF-3、AP-1(Fos)mRNA表达的影响。
　　 方法:分离30例克罗恩病患者外周血单核细胞并进行体外培养，分五组进行体外实验:A为空白对照组，B为单纯LPS刺激组，C为LPS与Novaferon同时加入组，D为先加入LPS刺激，后加入Novaferon组，E为先加入Novaferon，后加入LPS刺激组。在进行LPS刺激及Novaferon干预后检测培养液内TNF-α浓度（ELISA法），最后采用RT-PCR方法检测单核细胞内TRAF-6、JNK、p38、ERK、NF-κB、IRF-3、AP-1(Fos)信号因子mRNA表达。
　　 结果:体外培养的克罗恩病患者单核细胞能分泌少量TNF-α(442.9925±10.4656 pg/ml)，加入LPS刺激后，TNF-α的分泌明显增加（1261.5290±31.1830 pg/ml），在LPS刺激后再加入Novaferon，TNF-α的分泌明显减少(1261.5290±31.1830pg/ml vs850.1201±21.0327pg/m1，p＜0.01)，下降约32.60％。而Novaferon在LPS刺激前或与LPS同时加入培养细胞内时，对TNF-α分泌无影响（1261.5290±31.1830 pg/ml vs1231.1363±34.8911pg/ml,p＞0.05;1261.5290±31.1830pg/ml vs1256.2032±29.9132pg/ml，p＞0.05）。RT-PCR检测表明，Novaferon能够下调提前经LPS刺激的单核细胞TLR4信号通路中TRAF-6(0.1824±0.0346 vs0.1033±0.0225,p＜0.01)、 JNK(0.4552±0.0598 vs0.2567±0.0364,p＜0.01)、 ERK(0.3955±0.0539 vs0.1839±0.0269 p＜0.01)、 p38(0.5032±0.0499vs0.2842±0.0294, p＜0.01)、 NF-κB(0.4994±0.0604 vs0.2829±0.0365 p＜0.01) mRNA表达，而对AP-1(Fos)(0.6547±0.0395 vs0.6913±0.0223 p＞0.05)、 IRF-3(0.5396±0.0514 vs0.5427±0.0512 p＞0.05) mRNA表达无影响。对于未提前经LPS刺激的单核细胞，novaferon对其TLR4信号通路中相关信号因子mRNA表达并无影响。
　　 结论:Novaferon在体外能抑制LPS预先刺激的单核细胞分泌TNF-α并下调TLR4信号通路中TRAF-6、 JNK、 p38、 ERK、 NF-κ3mRNA表达，但对TLR4信号通路中IRF-3、 AP-1(Fos) mRNA表达无影响。

目录

声明

摘要

缩略词表

第一章 前言

第二章 材料与方法

第三章 统计分析

第四章 结果 离体实验

第五章 结果 临床试验

第六章 讨论

第七章 结论

参考文献

综述

致谢

攻读博士期间发表的论文及成果