吡非尼酮和N-乙酰半胱氨酸对博莱霉素所致小鼠纤维化肺NO24表达的影响

摘要

目的：观察NADPH氧化酶4(NOX4)在博莱霉素诱导小鼠肺纤维化肺组织中的表达及其意义，探讨吡非尼酮和N-乙酰半胱氨酸对NOX4表达的影响。
　　 方法：72只C57健康雌性小鼠随机分为正常对照组（C组），模型组（M组），吡非尼酮干预组（P组）和N乙酰半胱氨酸干预组(N组)四组，每组各18只。采用气管内注入博莱霉素（3.5 mg/kg）的方法构建小鼠肺纤维化模型，C组通过气管内注入同等量生理盐水作为对照。造模24小时后C组、M组小鼠均以生理盐水灌胃，P组以吡非尼酮灌胃，而N组于造模前一星期即开始以NAC灌胃。每组小鼠造模后分别于第7天、第14天、第28天三个时间点各随机处死6只，取肺组织病理切片行HE和Masson染色，观察肺纤维化程度，测肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量，通过免疫组织化学方法检测NOX4在肺组织中的表达情况。
　　 结果：1、博莱霉素气管内注药可成功构建小鼠肺纤维化动物模型。2、小鼠体重和肺系数:造模前四组小鼠体重差异无统计学意义(P＞0.05)，造模后小鼠体重开始下降，5～7天后体重缓慢增加，第7天、第14天、第28天三个时间点四组小鼠体重和肺系数差异均有统计学意义(P＜0.05)，其中M组小鼠体重下降最明显，肺系数较大，与C组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。3、Masson染色显示:造模后M组于第7天、第14天、第28天三个时间点肺纤维化评分较C组均增加(P＜0.05);P组和N组肺纤维化评分较M组降低(P＜0.05)。
　　 4、造模第7天、第14天、第28天三个时间点M组肺组织Hyp含量较C组均增高(P＜0.05);P组和N组肺组织Hyp含量较M组减低(P＜0.05)。5、免疫组化显示第造模7天、第14天、第28天三个时间点M组小鼠肺组织均可见在气道平滑肌细胞、上皮细胞、肺泡上皮细胞，以及血管平滑肌细胞、内皮细胞，肺成纤维细胞中NOX4广泛的强表达;C组NOX4表达较M组弱(P＜0.05);P组和N组NOX4表达较M组减弱(P＜0.05)，但与C组相比NOX4表达差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　 结论：1、气管内滴注博来霉素可以成功制作小鼠肺纤维化。2、NOX4在肺组织广泛表达，其表达上调可能与博莱霉素诱导的肺纤维化形成相关。3、PFD和NAC均可减轻博莱霉素诱导的肺纤维化程度，减少肺组织胶原的沉积，PFD和NAC均可以下调NOX4表达，提示NOX4有望成为治疗肺纤维化的新靶点。

目录

声明

摘要

缩略词说明

第一章 前言

第二章 材料及方法

2．1 主要实验设备

2．2 实验试剂

2．3 实验动物预备及管理

2．4 小鼠肺纤维化模型制备

2．5 实验动物药物干预

2．6 实验标本采集和保存

2．7 观察指标及检测方法

2．8 统计学处理方法的选择

2．9 实验流程简图

第三章 结果和统计学分析

3．1 小鼠的一般情况及体重、肺湿重变化

3．2．小鼠的肺系数

3．3 小鼠肺标本大体观

3．4 病理组织学观察

3．5 小鼠肺组织羟脯氨酸(Hyp)的含量变化

3．6 肺组织NOX4蛋白免疫组织化学法检测

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述

致谢