多发性骨髓瘤调节性T细胞和Th17细胞水平及相关转录因子mRNA表达分析与临床意义

摘要

目的:通过分析调节性T细胞（regulatory T cells，Tregs）、Th17细胞及其相应特异转录因子Foxp3、ROR-γt mRNA在多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)患者外周血中的水平，初步了解Treg细胞、Th17细胞在MM发病中的作用。
　　方法:收集43例MM患者（按ISS分期标准分期，Ⅰ期9例，Ⅱ期13例，Ⅲ期21例）和20例健康对照者，分别取入选者外周血分离单个核细胞，应用流式细胞术检测Treg细胞和Th17细胞占CD4+T细胞比例，统计实验数据，逐层分析比较各分期患者Treg细胞和Th17细胞的水平差异及初治和化疗后患者两组间差异，并作二者的相关性分析。同时应用Real-time PCR方法检测Foxp3 mRNA、ROR-γt mRNA的相对表达量，并相应分析各组间差异及二者相关性。
　　结果:(1)MM患者组外周血中Treg细胞/CD4+T细胞比例较健康对照组呈显著性升高，Foxp3 mRNA表达水平也较对照组显著升高，且Ⅲ期患者增加程度较Ⅰ、Ⅱ期显著。化疗后复治组患者Treg细胞比例较初治组明显下降，Foxp3 mRNA表达水平有下降趋势，但无统计学差异。(2) MM患者组外周血中Th17细胞/CD4+T细胞比例较健康对照组有升高趋势，但未发现统计学差异，但ROR-γt mRNA表达水平较对照组明显升高(P＜0.05)，而MM各分期之间Th17细胞/CD4+T细胞比例、ROR-γt mRNA表达水平未见统计学差异。化疗后复治组患者Th17细胞比例与初治组相比无明显差异，而ROR-γt mRNA表达水平较初治组有明显下降(P＜0.05)。(3) MM患者外周血中Treg、Th17细胞比例之间未发现明显相关性;Foxp3 mRNA、ROR-γt mRNA表达水平之间亦未发现明显相关性。
　　结论:Treg细胞比例及Foxp3mRNA水平在MM患者外周血中明显升高，并受疾病分期影响，且化疗后复治患者较初治患者低，提不Treg细胞可能参与MM患者肿瘤细胞免疫逃逸及恶性增殖;MM患者外周血Th17细胞比例亦有升高趋势，而ROR-γt mRNA表达水平明显升高，且化疗后复治患者比初治患者ROR-γt mRNA表达水平降低，提示Th17细胞水平在MM的发生发展过程中发挥某种作用;我们未发现Treg与Th17细胞比例之间以及Foxp3 mRNA、ROR-γtmRNA表达水平存在相关性，提示它们或许并不存在直接、单一的拮抗或促进关系。

目录

声明

摘要

1 前言

2 材料与方法

2．1 病例来源及标本收集

2．2 主要试剂

2．3 实验器材

2．4 实验方法

2．5 统计学分析

3 结果

3．1 流式细胞术检测结果分析

3．2 QRT-PCR检测结果分析

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 Th17细胞与恶性血液病

攻读学位期间主要的研究成果目录

致谢