LAT-B对家兔房水葡萄膜巩膜引流通路影响的基础研究

摘要

目的:研究LAT-B对家兔眼内压、葡萄膜巩膜通路、巩膜通透性的影响,为细胞骨架因子在青光眼治疗的临床应用及眼后节疾病的药物传递提供新的思路和理论依据。
　　方法:分别用LAT-B、BSS和DMSO局部应用于家兔眼,于用药前1h及用药后1、2、3、4、5、6、24h分别测量眼压,测眼压后部分取巩膜,自制巩膜滤过装置,测巩膜通透性变化,部分免疫组化测前部巩膜MMP2、TIMP2表达,免疫荧光组通过前房内注入微量示踪剂异硫氰酸荧光素牛血清白蛋白(Fluorescein isothiocyanate bovine serum albumin FITC-BSA),于点眼后2h,4h,6h,8h10h各处死家兔2只,摘除双侧眼球作冰冻切片,于荧光显微镜下观察并确定睫状体、脉络膜上腔、前、后巩膜和脉络膜的荧光强度等级。
　　结果:LAT-B滴眼后处理眼眼压不同时间点与滴眼前比较眼压呈下降趋势,差异有显著性(P<0.O5),1h即可引起眼压降低,24h仍有效,BSS组与DMSO组未引起眼压下降; LAT-B作用后的前部巩膜对平衡盐液的滤过较BSS组和DMSO组明显增加,(P<0.O5); LAT-B作用后前部巩膜MMP-2、TIMP-2的表达增加;葡萄膜巩膜途径(uveoscleral outflow FU)通路三组之间在睫状体、脉络膜上腔、前、后巩膜和脉络膜的荧光强度,各部位均为LAT-B组最强,LAT-B与BSS组和DMSO组相比差异均有显著性(P<0.O5),BSS组和DMSO组相比差异无显著性(P>0.05)。
　　结论:
　　1、LAT-B能够有效降低眼压,1小时即可起效,且24小时仍有效。
　　2、LAT-B能够明显提高巩膜的房水流出易度,伴随巩膜MMP-2、TIMP-2的表达升高,这可能导致巩膜胶原重塑。这对临床上增加眼内后节疾病治疗药物的传递有一定启发意义。
　　3、LAT-B可以增加FU通路的房水流出率,具有治疗青光眼的应用前景,尤其是正常眼压性青光眼,开角性青光眼。

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前言

实验材料

1、动物与分组

2、主要仪器

实验方法

1、药物的配制：

2、眼压测定：

3、 FITC-BSA前房注入：

4、冰冻切片制作与荧光强度观察：

5、光学显微镜观察：

6、巩膜通透性的观察：

7、HE染色及免疫组化染色：

8、结果判定

9、统计学分析

结果

1、 眼压变化情况：

2、荧光显微镜观察

3、巩膜滤过实验

4、巩膜免疫组化及光镜观察

讨论

LAT-B与眼压

LAT-B与FU通路：

LAT-B与巩膜渗透性：

增加通透性的机制：

结论

参考文献

综述

致谢