奥曲肽对人结肠癌细胞株-catenin蛋白及生长抑素受体表达的影响

摘要

目的：通过检测生长抑素类似物奥曲肽处理前后两种人结肠癌细胞株(SW480、HCT116)中β-Catenin及磷酸化β-Catenin表达水平的变化，以及检测两种细胞株中五种生长抑素受体mRNA表达水平，研究生长抑素对不同基因型的结肠癌细胞株Wnt/β-Catenin信号通路及生长抑素受体表达的影响，并进一步探讨两种人结肠癌细胞株与生长抑素、生长抑素受体以及Wnt/β-Catenin信号通路三者之间可能存在的关系，以进一步阐明生长抑素的抗肿瘤机制。 方法：应用Western blot检测奥曲肽处理前后人结肠癌细胞株SW480和HCT116中β-Catenin蛋白及磷酸化β-Catenin蛋白水平的变化，；同时应用RT-PCR检测奥曲肽作用前后两种结肠癌细胞株中的五种生长抑素受体亚型mRNA表达情况。 结果：(1)对照组SW480细胞中β-Catenin蛋白和磷酸化β-Catenin蛋白的灰度值分别为(39.76±4.36，15.12±3.31)。实验组中SW480细胞中β-Catenin蛋白和磷酸化β-Catenin蛋白的灰度值分别为(21.11±3.31，31.19±2.15)。与对照组相比，β-Catenin蛋白表达减少，磷酸化β-Catenin蛋白的表达增加(p<0.01)。 (2)对照组HCT116细胞中β-Catenin蛋白和磷酸化β-Catenin蛋白的灰度值分别为(28.29±5.24，13.29±1.42)。实验组中SW480细胞中β-Catenin蛋白和磷酸化β-Catenin蛋白的灰度值分别为(16.23±3.16，27.33±2.16)。与对照组相比，β-Catenin蛋白表达减少，磷酸化β-Catenin蛋白的表达增加(p<0.01) (3)对照组SW480细胞中SSTR2，SSTR3，SSTR5三种受体亚型mRNA的吸光度值依次为(2.518±0.2125，1.015±0.1078，1.650±0.0689)，实验组中SSTR2，SSTR3，SSTR5三种受体亚型mRNA的吸光度值依次为(3.985±0.3969，2.046±0.4516，2.512±0.3612)，与对照组相比，SSTR2、SSTR3、SSTR5三种受体亚型表达强度有明显增强(P<0.05)。 (4)对照组HCT116细胞中SSTR2，SSTR3，SSTR5三种受体亚型mRNA的吸光度值依次为(1.0704±0.0124，0.4283±0.0246，1.7791±0.1692)，实验组中三种受体亚型mRNA的吸光度值依次为(1.5882±0.1695，0.6735±0.1881，2.1735±0.2126)，与对照组相比，SSTR2、SSTR3、SSTR5三种受体亚型表达强度有明显增强(P<0.05)。 (5)SW480细胞中SSTR1，SSTR4两种受体亚型的mRNA表达对照组分别为(1.775±0.1897，0.983±0.1368)，实验组分别为(1.738±0.1543，1.054±0.1975)；HCT116细胞中SSTR1，SSTR4两种受体亚型的mRNA表达对照组分别为(1.6086±0.1783，0.6148±0.1056)，实验组分别为(1.7682±0.0547，0.6324±0.1057)。实验组与对照组相比，差异无显著性(P>0.05)。 结论： 1.奥曲肽能下调结肠癌细胞SW480中β-Catenin蛋白表达，上调磷酸化β-Catenin蛋白表达，促进β-Catenin蛋白的磷酸化。 2.奥曲肽能下调结肠癌细胞HCT116中β-Catenin蛋白表达，上调磷酸化β-Catenin蛋白表达，促进β-Catenin蛋白的磷酸化。 3.奥曲肽能抑制不同基因型的结肠癌细胞株中的β-Catenin信号通路。 4.SW480和HCT116结肠癌细胞中均存在五种生长抑素受体亚型的表达，不同的结肠癌细胞生长抑素受体各亚型表达的相对强度不同。 5.奥曲肽能影响生长抑素受体的表达，上调结肠癌细胞株SW480和HCT116中SSTR2，SSTR3，SSTR5三种受体亚型的表达。