二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞凋亡及其对Fas、FasL、Caspase-8表达的影响

摘要

目的：研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病K562细胞凋亡作用,探讨DADS诱导K562细胞凋亡作用的时间依赖性与浓度依赖性;并探讨DADS诱导K562细胞凋亡的分子机制,为药物临床应用提供理论和科学依据。
　　方法：体外培养人红白血病K562细胞,分为空白组及药物处理组两大组,药物处理组加入不同浓度DADS,取对数生长期细胞进行实验。采用 Hoechst33258染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术(FCM)分析不同浓度及不同时间 DADS对K562细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR法检测DADS作用K562细胞48h后 Fas、FasL、Caspase-8基因的mRNA表达变化。
　　结果：1、DADS可诱导K562细胞凋亡,K562细胞出现细胞核缩小,染色质凝集、核膜破裂等凋亡特征。2、DADS(作用细胞24h)浓度从10mg/L增至40 mg/L时,其对 K562细胞的凋亡率由(11.60±0.83)％增至(37.94±0.87)%;DADS(40 mg/L浓度组)作用时间从24 h增至72 h,其对 K562细胞的凋亡率由(37.94±0.87)%增至(47.02±0.66)%,各实验组随时间、浓度增加凋亡率明显增加(p<0.01),提示 DADS对K562细胞的凋亡效用与药物浓度、作用时间有明显依赖关系3、40mg/L DADS作用K562细胞48 h后,Fas、Caspase-8 mRNA表达水平较对照组上调;FasL mRNA较对照组下调(p<0.05)。
　　结论：1、DADS能够诱导 K562细胞凋亡。2、其凋亡机制可能与上调Fas、caspase-8,下调FasL,激活Fas/FasL死亡受体通路有关。

目录

声明

目录

主要缩略英文索引

中文摘要

英文摘要

前言

1.材料

1.1材料和试剂

1.2实验主要试剂及其配制

1.3主要仪器

2.方法

2.1细胞培养

2.2 药物配制

2.3 细胞分组

2.4 实验方法

2.5统计学分析

3. 结果

3.1 Hoechst 33258染色检测细胞形态学变化

3.2 流式细胞仪检测DADS对K 562细胞凋亡率的作用

4、讨论

5.结论

5.1二烯丙基二硫（DADS）能诱导K562细胞凋亡；

5.2 凋亡机制可能是通过上调 Fas、Caspase-8，下调 FasL 表达，激活外源性

参考文献

综述

参考文献

硕士期间发表的论文

致谢