巴柳氮钠对实验性末端回肠炎的防治作用及肠上皮细胞TLR2、TLR4的影响

摘要

目的：本研究通过回肠-盲肠侧侧吻合术建立大鼠实验性末端回肠炎动物模型观察巴柳氮钠的防治作用及对肠上皮细胞TLR2、TLR4的影响。
　　方法：清洁级、雄性健康SD大鼠100只，随机分为A-E五组：正常对照组（A）、造模对照组（B）、巴柳氮钠50mg.kg-1.d-1组（C）、75mg.kg-1.d-1组（D）及100 mg.kg-1.d-1组（E），每组20只。B-E组分别行回肠末端-盲肠侧侧吻合术、A组只作腹腔注射麻醉。造模后2周时，C-E组大鼠分别给予巴柳氮钠50mg.kg-1.d-1、75mg.kg-1.d-1、100mg.kg-1.d-1悬液各1ml灌胃处理，A、B组予以生理盐水1ml灌胃作为对照，期间观察术后动物的一般状态。术后第4、8周分批处死动物，取距吻合口1-3cm处末端回肠组织，行苏木素－伊红（hematoxylin-eosin staining, HE）染色，观察五组大鼠末端回肠组织的病理变化，进行肉眼、镜下炎症评分（histopathological score,HS）及上皮间淋巴细胞（intraepithelial lymphocyte，IEL）计数。使用免疫组化（immunohistochemistry, IHC）染色（Elivison二步法）检测各组末端回肠炎粘膜中TLR2、TLR4的表达情况。
　　结果：⑴实验动物的一般情况术后3-5天，所有造模SD大鼠均出现一般状况差，其中体重下降较明显，此时造模组和巴柳氮钠各组与正常对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。2-4周各组体重逐步恢复,4周后各时期五组的体重下降无统计学意义( P>0.05)。⑵末端回肠组织肉眼组织病理学评分4周时，所有造模SD大鼠末端回肠组织肉眼观均为以急性炎症为主的表现，但造模组炎症较巴柳氮钠各组重，评分有统计学意义（P<0.05）；随着巴柳氮钠灌胃剂量的增加，三组炎症程度逐渐减轻，评分有统计学意义（P<0.05）。8周时，造模组炎症明显，而巴柳氮钠各组炎症程度依次减轻，四组评分有统计学意义（P<0.05）。⑶末端回肠组织光镜下组织病理学评分4周时，各手术组末端回肠组织镜下观均为急性炎症为主的表现，B组的HS高于A、C、D、E组（P<0.05)；随着巴柳氮钠灌胃剂量的增加，三组炎症程度依次减轻，评分有统计学意义（P<0.05）。8周时，B、C-E组进入慢性炎症表现，B组与A、C-E组相比，有统计学意义（P<0.05）；而此时期 C-E组炎症明显减轻，三组相比有统计学意义（P<0.05）。⑷末端回肠组织上皮间淋巴细胞计数4周时，B组上皮间淋巴细胞计数高于A、C-E组（P<0.05）；C-E组上皮间淋巴细胞计数高于A组（P<0.05），随着巴柳氮钠灌胃剂量的增加，C-E三组间淋巴细胞计数依次降低（P<0.05）。8周时，B组镜下以上皮间淋巴细胞浸润粘膜及粘膜下层为主，与A、C-E组相比，有统计学意义（P<0.05）。C-E组镜下上皮间淋巴细胞计数依次减少，三组评分有统计学意义（P<0.05）,其中E组与A组相比，无统计学意义（P>0.05）。⑸末端回肠组织TLR2、TLR4的表达4周时，B组末端回肠组织TLR2、TLR4平均吸光度（A）值高于A、C-E组(P<0.05),C-E组TLR2、TLR4平均吸光度（A）值高于A组(P<0.05)，随着巴柳氮钠灌胃剂量的增大，C-E组TLR2、TLR4平均吸光度（A）值依次降低（P<0.05）。8周时，造模组 TLR2、TLR4的平均吸光度（A）值高于A、C-E组（P<0.05）；C-D组TLR2、TLR4的平均吸光度值高于A组(P<0.05)，而E组TLR2、TLR4的平均吸光度值接近A组(P>0.05)。TLR2、TLR4的平均吸光度（A）值与镜下组织病理学评分呈正相关（P<0.05）。
　　结论：①巴柳氮钠对实验性末端回肠炎具有防治作用，且呈时间剂量依赖关系。②在实验性末端回肠炎发病过程中TLR2、TLR4表达增加,且巴柳氮钠对实验性末端回肠炎的防治作用可能与其阻断或抑制肠组织TLR2、TLR4的信号传导及免疫应答有关。

目录

封面

声明

目录

英文缩略词表

中文摘要

英文摘要

前言

材料和方法

一、实验动物

二、主要试剂和饲料

三、主要实验仪器

四、实验方法

结果

1 各组SD大鼠的存活及一般状况变化

2 各组SD大鼠末端回肠组织肉眼观

3 各组SD大鼠末端回肠组织镜下观

4 各组SD大鼠上皮间淋巴细胞计数

5 各组SD大鼠末端回肠组织TLR2、TLR4的表达情况

讨论

1 术后SD大鼠的一般状况及不同时段回肠末端组织病理变化

2 上皮间淋巴细胞与CTI的关系

3 TLR2、TLR4与实验性末端回肠炎的关系

4 BLZ对ETI不同阶段肠道炎症的疗效

结论

参考文献

综述：肠黏膜机械屏障的研究进展

研究生期间发表论文

致谢