拉帕替尼联合帕比司他对乳腺癌细胞生长的影响及作用机制研究

摘要

目的：观察拉帕替尼联合帕比司他对乳腺癌细胞生长增殖的影响，并初步探讨其作用机制。
　　方法：体外培养乳腺癌细胞系 SK-BR3细胞，给予不同浓度的拉帕替尼和（或）帕比司他作用72h，WST-1检测细胞的增殖情况；PCR检测拉帕替尼和帕比司他作用 SK-BR3细胞24h后ERBB1，ERBB2，ERBB3 mRNA的表达水平；Western blot检测ERBB1，ERBB2，ERBB3蛋白的表达，AKT，ERK1/2和H2A.X的磷酸化，以及 PARP的表达变化情况；流式细胞术检测细胞凋亡。
　　结果：随着拉帕替尼和帕比司他剂量的增加，各自单药及联合使用对 SK-BR3细胞的生长抑制作用逐渐加强。当两者联合使用对SK-BR3细胞抑制率为50％时，拉帕替尼和帕比司他的联合系数为0.59。0.3μmol/L拉帕替尼可下调 ERBB1和ERBB2 mRNA以及EGFR和Her2表达。当其联合15nmol/L帕比司他作用24h后，ERBB1和ERBB2 mRNA以及EGFR和Her2表达水平显著降低。此外，0.3μmol/L拉帕替尼也能下调Her3 mRNA和蛋白表达。而两者联合使用后，可进一步降低 Her3的mRNA和蛋白的表达。此外，采用0.3μmol/L拉帕替尼和15nmol/L帕比司他联合处理细胞后，磷酸化 AKT和ERK1/2的水平显著降低。单纯给予15nmol/L帕比司他处理SK-BR3细胞对凋亡无明显影响。给予0.3μmo/L拉帕替尼处理后，SK-BR3细胞凋亡有所增加，但给予0.3μmol/L拉帕替尼和15nmol/L帕比司他共同作用后，细胞凋亡比例显著增高。同时，磷酸化γ-H2A.X和PARP含量也显著增多。
　　结论：拉帕替尼联合帕比司他对乳腺癌细胞生长抑制具有协同作用，其机制可能是通过抑制AKT，ERK通路的激活从而诱导细胞的凋亡。

目录

封面

声明

常用英文缩写

中文摘要

英文摘要

目录

第1章 绪 论

第2章 材料与方法

（一）实验材料

（二）方 法

第3章 结 果

1拉帕替尼和帕比司他均可抑制SK-BR3细胞增殖

2拉帕替尼联合帕比司他对SK-BR3细胞ERBB1和ERBB2 mRNA表达的影响

3拉帕替尼联合帕比司他对SK-BR3细胞EGFR和Her2表达的影响

4拉帕替尼联合帕比司他对AKT磷酸化的影响

5拉帕替尼联合帕比司他对ERK1/2磷酸化的影响

6拉帕替尼联合帕比司他对Her3 mRNA表达的影响

7拉帕替尼联合帕比司对Her3 蛋白表达的影响

8 帕比司他可协同拉帕替尼促进SK-BR3细胞凋亡

9帕比司他可协同拉帕替尼促进凋亡相关分子的表达

第4章 讨 论

第5章 结 论

附录

参考文献

综述:新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂临床应用研究进展

攻读学位期间所获科研成果

致谢