雷氏蛛毒及中药干预小鼠H22皮下移植肝肿瘤后RhoA/ROCK信号通路蛋白表达的变化

摘要

目的：
　　本文拟采用雷氏大疣蛛毒及中药干预手段，探讨RhoA/Rock信号通路及相关细胞因子，在小鼠H22皮下移植肝肿瘤中的差异表达和可能分子机制。
　　方法：
　　参照皮下注射法，将配置好浓度为5×106个/ml小鼠H22肝癌细胞悬液，皮下接种于每只实验 KM小鼠后颈部建模。建模成功后，将小鼠随机分为3组：模型对照组（M），中药经验方组(A)和雷氏大疣蛛毒素组(R)，每一组各10只。三天后，各干预组动物成功建模,然后分别进行中药和雷氏大疣蛛毒素干预。（M）组每只小鼠在尾静脉注射生理盐水0.3ml，（R）组每只小鼠在尾静脉注射药剂浓度为0.2μg/μl的雷氏大疣蛛毒素0.3ml，（A）组每天灌胃一次（0.4ml/次），每天一次，均连续给药20d。每2天给各三组实验动物测量肿瘤体积1次，并绘制出每次肿瘤的生长曲线。到期后各小鼠禁食过夜处死，并仔细分离出其肿瘤组织，然后进行组织取材。肿瘤体积测量法计算出肿瘤体积的大小；HE染色观察肿瘤细胞形态结构的变化；免疫组织化技术检测各组肿瘤组织中RhoA/ROCK信号通路及相关细胞因子蛋白水平的表达情况。
　　结果：
　　①肿瘤体积测量法计算出肿瘤体积生长速度：（R)组生长速度最慢；（A)组次之；（M)组最快。
　　②HE染色显示：（R)组小鼠:：肿瘤细胞排列稀疏、不规则，肿瘤细胞核固缩，可见异型细胞。并见片状空泡样变性、出现大面积坏死区。(A)组小鼠：肿瘤细胞排列松散、无序，出现坏死区，胞核较小、破坏不明显，可见少量空泡样变性。(M)组小鼠：肿瘤细胞排列规整、紧密、核染色深且异型性明显，核质比较大，实质和间质分界不清，无明显坏死组织。
　　③免疫组织化学染色结果显示：（A）组及（R）组二个干预组中小鼠肿瘤组织p21阳性表达率均明显高于（M）组，而其中的RhoA、ROCK阳性表达却较（M）组低（P<0.01）。
　　结论：
　　本研究发现雷氏大疣蛛毒素及中药，对小鼠皮下移植的H22肝肿瘤生长和增殖有明显的抑制作用。它们下调了RhoA、ROCK的表达和上调了p21蛋白表达，其效果雷氏大疣蛛毒组最明显。雷氏大疣蛛毒素和中药可能通过调节RhoA/ROCK信号通路中RhoA、ROCK和p21等相关细胞因子的表达，从而抑制了肿瘤细胞的增殖。

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主要缩略词及英文索引

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英文摘要

第一章 前 言

第二章 实验材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 统计学分析

第三章 实 验 结 果

3.1动物一般行为学观察

3.2小鼠肿瘤体积测量

3.3各组小鼠肿瘤组织HE染色形态学观察

3.4 各组小鼠肿瘤组织RhoA、ROCK、p21免疫组化检测结果

第四章 讨 论

有待进一步研究的问题

第五章 结 论

参考文献

综述:RhoA/ROCK信号通路及相关细胞因子与肿瘤

科 研 情 况

致谢