W11-a12促进大鼠小肠吻合口愈合的研究

摘要

目的：通过术中对大鼠小肠吻合口局部应用美洲大蠊提取物W11-a12，旨在探索美洲大蠊提取物 W11-a12能够促进大鼠小肠吻合口的愈合。
　　方法：
　　取SD大鼠48只，行小肠部分切除及小肠端端吻合术。术后随机抽签分为两组：A组空白对照组、B组W11-a12组。每组24只。予吻合口旁：A组喷涂生理盐水，B组喷涂W11-a12溶液。术后观察大鼠的生存情况。于术后第3、5、7天各组随机抽取8只大鼠麻醉处死。剖腹观察腹腔内粘连及吻合口情况，确定吻合口位置后，切取以吻合口为中心长约5cm的小肠。测量吻合口爆破压后部分标本用于测定羟脯氨酸含量。其它标本行HE染色、Masson染色、免疫组织化学染色，光镜下观察吻合口的炎性细胞浸润及愈合情况，检测CD31、VEGF表达。所得数据使用统计学软件SPSS18.0进行分析。
　　结果：1、一般情况：有两只大鼠死亡，1只为第2天空白组，另1只为第3天的W11-a12组，两者死亡原因均为肠吻合口漏致腹腔感染。其余各组大鼠生存状态良好。
　　2、腹腔粘连指数：术后各组大鼠腹腔内均有不同程度的粘连，且随着时间的推移，腹腔粘连程度逐渐增加。术后各时间点 W11-a12组的粘连指数均低于对照组，且第3、5天有统计学意义（P＜0.05)。
　　3、吻合口爆破压：术后各组吻合口爆破压均随着时间的增加而升高。术后各时间点W11-a12组的吻合口爆破压均高于对照组，且第3、5、7天有统计学意义（P＜0.05)。
　　5、羟脯氨酸测定：术后各组小肠吻合口组织的羟脯氨酸含量均随着时间的延长而逐渐上升。术后各时间点 W11-a12组的羟脯氨酸含量均高于对照组，且第3、5、7天有统计学意义（p＜0.05）。
　　6、吻合口组织HE染色观察：术后各组的炎症反应均随着时间的延长而减轻。术后3天，对照组的中性粒细胞数及坏死组织比W11-a12组多（p＜0.05）。术后第5天，中性粒细胞数减少，单核细胞，淋巴细胞增多，新生肉芽组织生成（p＜0.05）。
　　7、Masson染色结果：随着时间的延长，胶原合成数量由少到多，由细到粗，由稀疏到密集，由排列无序到有一定趋向性。术后各时间点W11-a12组的胶原含量均高于对照组，且第3、5、7天有统计学意义。
　　8、CD31/VEGF免疫组化结果：随着时间的延长，各组CD31/VEGF的平均灰度值均呈逐渐升高趋势。术后第3、5天，W11-a12组的阳性表达细胞明显高于对照组（P＜0.05）。术后第7天，W11-a12组的阳性表达细胞稍高于对照组（P＞0.05）。
　　结论：1、局部使用 W11-a12对大鼠小肠吻合口早期愈合的具有明显的促进作用。

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主要英文缩略语索引

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英文摘要

第1章 前 言

第2章 材料与方法

1、实验材料

1.1 主要试剂

1.2 主要仪器

1.3 主要试剂配制

2 实验方法

2.1 实验动物：

2.2术前准备

2.3 手术步骤

2.4 术后管理与动物喂养

2.5标本处理

2.6标本及取材

3 实验观察测量指标及测定

3.1 一般情况观察

3.2 腹腔粘连评分

3.3 吻合口组织爆破压的测定(ABP)

3.4 羟脯氨酸测定（HYP）

3.5 HE染色

3.6 Masson三色染色

3.7、SP法检测VEGF/CD31表达

4、统计方法

第3章 结 果

1、一般观察

2、腹腔粘连情况

3、吻合口爆破压(ABP)测定

4、羟脯氨酸(HYP)测定

5、吻合口组织HE染色

6、Masson染色

7、CD31/VEGF免疫组化结果

第4章 讨 论

第5章结论

参考文献

综述:美洲大蠊提取物的药理作用及临床应用研究进展

成 果 附 录

致谢