肠道α-防御素-5,β-防御素-2在急性肝衰竭的时空表达研究

摘要

背景：急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)病因繁多，发病机制复杂，现阶段肠黏膜屏障功能障碍导致的肠源性内毒素血症在肝功能衰竭发生发展中的作用日益受到重视。肠源性内毒素血症的发生与肠道细菌异位、肠粘膜屏障功能的受损、肠粘膜抗菌能力下降有关，而肠道α，β-防御素是哺乳动物对抗肠道致病菌的抗菌肽，能有效杀灭外界侵入的致病菌或者发生移位的共生菌，抵抗致病菌的定植，维护了由正常菌群组成的肠黏膜生物屏障。肠源性内毒素血症发生的同时，肠道α、β-防御素是否发生了变化，发生了怎样的变化，相关文献报道不多。
　　目的：观察肠道α-防御素-5，β-防御素-2 mRNA在急性肝功能衰竭造模后不同时间的动态表达，探讨其在急性肝衰竭发病机制中的作用。
　　方法：将90只C57BL6小鼠随机分为4组：正常对照组，ALF造模组，大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)灌胃组，ALF造模加E.coli灌胃组。采用氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GaLN)500mg/kg加脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)10μg/kg腹腔注射造模，另对ALF小鼠予大肠埃希菌灌胃，观察时间点为6小时、12小时、24小时，每个时间点6个标本，检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的变化情况；观察肝脏、回肠病理改变；采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,Real-Time PCR)方法检测回肠末端组织α-防御素-5(α-defensin-5,RD-5)、β-防御素-2(β-defensin-2,BD-2) mRNA的表达。
　　结果：(1)与对照组的11.25±0.74、23.86±0.39相比，ALF造模组小鼠回肠组织RD-5、BD-2 mRNA表达量在6小时升高分别为：14.19±0.39(p<0.01)、26.79±0.36(p<0.01)，12小时达到高峰分别为：15.76±0.33(p<0.01)、29.10±0.61(p<0.01)，24小时轻度升高分别为：11.86±0.89(p<0.05)、24.71±0.45(p<0.05)；(2)与对照组的11.25±0.74、23.86±0.39相比，ALF造模加E.coli灌胃组小鼠回肠组织RD-5、BD-2 mRNA表达量在6小时升高分别为：12.57±0.68(p<0.05)、26.45±0.85(p<0.01)，12小时达到高峰分别为：12.90±0.96(p<0.01)、27.42±0.71(p<0.01)；(3)与对照组的11.25±0.74、23.86±0.39相比，E.coli灌胃组小鼠回肠组织RD-5、BD-2 mRNA表达量6小时达到高峰分别为：11.82±0.72(p<0.05)、25.56±0.55(p<0.01)，12小时升高分别为：11.71±0.69(p<0.05)、25.48±0.43(p<0.01),24小时升高分别为：11.77±0.58(p<0.05)、25.64±0.48(p<0.01)；(4)与ALF造模加E.coli灌胃组的12.57±0.68及E.coli灌胃组的11.82±0.72相比，小鼠回肠组织RD-5 mRNA表达量，ALF造模组在6小时更高，为14.19±0.39(p值均<0.01)，与ALF造模加E.coli灌胃组的26.45±0.85相比，BD-2 mRNA表达量差异无统计学意义，为26.79±0.36(p>0.05)，与E.coli灌胃组的25.56±0.55相比，升高更明显(p<0.05)；(5)与ALF造模加E.coli灌胃组的12.90±0.96、27.42±0.71及E.coli灌胃组的11.71±0.69、25.48±0.43相比，小鼠回肠组织RD-5、BD-2 mRNA表达量，ALF造模组在12小时更高，分别为15.76±0.33、29.10±0.61(p值均<0.01)。
　　结论：α-防御素-5、β-防御素-2可能在实验性急性肝衰竭肠源性内毒素血症发病机制中起一定作用。

目录

声明

主要中英文缩略词

第1章 绪 论

1.1 国内外研究现状

1.2 研究内容及意义

第2章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 统计学处理

第3章 结 果

3.1 基本情况

3.2 小鼠肝功能的动态变化

3.3 小鼠肝脏、回肠病理的改变

3.4 小鼠回肠组织RD-5、BD-2 mRNA表达的动态变化

第4章 讨 论

4.1 脓毒症急性肝衰竭实验模型

4.2 肠道α-防御素-5，β-防御素-2 mRNA在急性肝衰竭的变化

第5章 结 论

参考文献

综述:人α-防御素-5的研究进展

硕士期间主持/参与的科研项目

硕士期间发表文章

致谢