拟环纹豹蛛（Pardosa pseudoannulata）对有机磷杀虫剂的抗性机制

摘要

本论文首次运用生化法研究了长期农药胁迫对拟环纹豹蛛Pardosapseudoannulata体内乙酰胆碱酯酶(AChE)、羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的影响，旨在探明拟环纹豹蛛对有机磷杀虫剂的抗性机制。笔者主要从如下几个方面进行了探讨，并获得相关结果： 1.敏感型和抗性型拟环纹豹蛛的大龄幼蛛和成蛛体内，乙酰胆碱酯酶活性均以头胸部最高，附肢次之，腹部最低。敏感型和抗性型大龄幼蛛头胸部乙酰胆碱酯酶活性占总活性的比例分别为50.49﹪和42.37﹪；雌蛛的分别为43.89﹪和39.78﹪；雄蛛的分别为46.47﹪和42.38﹪。 2.拟环纹豹蛛不同发育阶段乙酰胆碱酯酶与抗药性关系。酶活性测定表明，在卵囊、大龄幼蛛和成蛛阶段，抗性型拟环纹豹蛛的乙酰胆碱酯酶活性较敏感型的要低。酶动力学研究表明，抗性型拟环纹豹蛛卵囊、大龄幼蛛和雌雄成蛛的Km值明显高于敏感型，分别为敏感型的1.56倍，1.94倍，1.85倍和2.78倍。拟环纹豹蛛对有机磷类杀虫剂产生抗药性可能与乙酰胆碱酯酶对有机磷的不敏感性有关。 3.羧酸酯酶在拟环纹豹蛛体内的分布特征。敏感型和抗性型拟环纹豹蛛的大龄幼蛛和成蛛体内，羧酸酯酶活性均以腹部最高，头胸部次之，附肢最低。敏感型和抗性型大龄幼蛛腹部羧酸酯酶活性占总活性的比例分别为75.21﹪和72.17﹪；雌蛛的分别为72.67﹪和73.43﹪；雄蛛的分别为71.02﹪和71.90﹪。 4.拟环纹豹蛛不同发育阶段羧酸酯酶与抗药性关系。酶活性测定表明：抗性型拟环纹豹蛛羧酸酯酶活性明显高于敏感型。抗性型卵囊、大龄幼蛛、雌蛛和雄蛛羧酸酯酶活性分别为敏感型的5.63倍、2.58倍、1.84倍和1.27倍。酶动力学研究表明：抗性型大龄幼蛛和成蛛的Km值低于敏感型。抗性型拟环纹豹蛛的平均羧酸酯酶活性为30.023nmol/mg·min，而敏感型的为16.500nmol/mg·min，抗性型羧酸酯酶活性与敏感型的总体平均数差异极显著(P＜0.01)。敏感型拟环纹豹蛛高羧酸酯酶活性的个体出现频率为12.5﹪，而抗性型的则为42.5﹪。甲胺磷对羧酸酯酶活性抑制率的测定表明，随着甲胺磷浓度的升高，羧酸酯酶的活性下降，对抗性型的抑制率低于对敏感型的抑制率。

目录

文摘

英文文摘

1.前言

1.1本研究的背景

1.2农药对天敌作用的研究进展

1.3抗药性机制研究进展

1.4本研究的目的与意义

2.材料与方法

2.1材料

2.1.1供试蜘蛛

2.1.2药品及试剂

2.1.3仪器设备

2.2方法

2.2.1乙酰胆碱酯酶活性的测定

2.2.2羧酸酯酶活性的测定

2.2.3谷胱甘肽S-转移酶活性的测定

2.2.4蛋白质含量的定量测定

2.2.5乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶动力学性质测定

2.2.6甲胺磷对羧酸酯酶活性的抑制率测定

2.2.7甲胺磷对谷胱甘肽S-转移酶活性的抑制率测定

2.2.8甲胺磷对乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶影响的测定

3.结果与分析

3.1乙酰胆碱酯酶在拟环纹豹蛛体内的分布

3.2拟环纹豹蛛乙酰胆碱酯酶与抗药性的关系

3.3羧酸酯酶在拟环纹豹蛛体内的分布

3.4拟环纹豹蛛羧酸酯酶与抗药性的关系

3.5拟环纹豹蛛谷胱甘肽S-转移酶与抗药性的关系

3.6甲胺磷对拟环纹豹蛛乙酰胆碱酯酶的影响

3.7甲胺磷对拟环纹豹蛛羧酸酯酶的影响

4.讨论

参考文献

附 录

致 谢

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