雌核发育鲫鲤早期胚胎发育及后代遗传性状分析研究

摘要

雌核发育二倍体鲫鲤产生二倍体卵子是一种很独特而又很重要的生物学现象。异源四倍体鲫鲤拥有4套染色体并能产生二倍体卵子，且产生的二倍体卵子在无需加倍处理的情况下，经灭活精子的诱导便可发育成雌核发育二倍体鱼，并可以在不加倍处理的情况下进一步进行雌核发育传代培育。本文对雌核发育鲫鲤第三代的早期胚胎发育进行了观察，并采用RAPD技术，进一步对雌核发育鲫鲤第二、三代的遗传多样性、遗传纯度进行了研究。 1雌核发育鲫鲤早期胚胎发育的观察雌核发育二倍体鲫鲤第二代(G2)产生的二倍体卵子经紫外线灭活的散鳞镜鲤精子诱导，无需染色体加倍处理，发育成为雌核发育鲫鲤第三代(G3)，其胚胎发育有着与异源四倍体鲫鲤相似的正常的时空发育程序，并能大量形成可存活的雌核发育后代。G2产生的卵子为粘性卵，色素含量高，共产生3种类型的卵子：(1)直径为L35mm的小型卵子约占2.47％，与红鲫产生的单倍体卵子大小相近，为单倍体卵子；(2)直径为L74mm的中型卵子约占95.64％，与异源四倍体鲤鲫产生的二倍体卵子大小一致，为二倍体卵子；(3)直径为1.93mm的大型卵子约占1.89％，可能为更高倍性的卵子。在(19±1)℃水温下，受精后70min第一次卵裂，原肠晚期统计过原肠的百分率为50％，约89h后，受精卵开始脱膜，约106.5h后，胚体完全脱膜，最终统计孵化率为26.11％。该试验从胚胎学的角度证明了雌核发育二倍体鱼产三的二倍体卵子被灭活的精子激活后在无需染色体加倍处理的情况下能自主发育，具有正常的胚胎发育的时序并产生存活的个体。 2雌核发育鲫鲤二倍体后代(G2、G3)的RAPD分析在优化RAPD检测条件基础上，从300个随机引物中筛选出48个扩增较好且多态性强的引物，对异源四倍体雌核发育鲫鲤第二代(G2)、第三代(G3)群体相互间扩增的DNA片段的同异性进行了比较研究。结果显示，这两个人工雌核发育群体具有较高的同源性，且同一雌核发育群体内部不同个体之间的同源性高于不同雌核发育群体之间的同源性。48个随机引物在G2、G3群体中分别检测到406和389个位点，在G2、G3群体的16个个体中共扩增出6366条带，其中G2和G3群体分别扩增出3272和3094条带，平均每个引物在每尾鱼中分别扩增出8.52和8.06条带。两个群体的多态性位点数分别为41和32，多态位点比例分别为10.10％和8.23％，种群内平均遗传距离分别为0.0224和0.0201，两种群问的平均遗传距离为0.0358。试验结果表明随着雌核发育传代的加深，遗传纯度进一步提高，说明经过连续的人工雌核发育可以使雌核发育杂交品系的纯度提高。由引物S129、S236扩增出的特异谱带可以作为第2、3代雌核发育群体间的分子遗传标记，这为进一步探讨雌核发育种质资源的遗传多样性提供重要参考。

目录

文摘

英文文摘

第一章前言

第二章雌核发育鲫鲤早期胚胎发育观察

第三章雌核发育鲫鲤第二、三代的RAPD分析

参考文献

附录 硕士期间撰写、发表与课题相关的学术论文

致谢

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