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摘 要
Abstract
目 录
第1章 绪 论
1.1引言
1.2受体与配体相互作用简述
1.2.1受体与配体简介
1.2.2受体与配体相互作用
1.3受体与配体分子相互作用研究方法
1.3.1表面等离子共振传感技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)
1.3.2荧光相关光谱(Fluorescence Correlation/Cross-Correlation Spectroscopy,FCS/FCCS)
1.3.3荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)
1.3.4单颗粒示踪技术(Single Particle Trcking,SPT)
1.4本论文研究构思
第2章 基于单颗粒示踪技术的细胞膜受体与配体相互作用研究
2.1前言
2.2实验部分
2.2.1实验试剂和仪器
2.2.2纳米探针的制备与表征
2.2.3细胞培养
2.2.4探针活性检测实验
2.2.5单颗粒成像实验
2.2.6全内反射荧光观察整联蛋白密度
2.2.7单颗粒瞬时速率及扩散系数计算
2.2.8单颗粒示踪数据解析
2.3结果与讨论
2.3.1纳米探针的表征
2.3.2探究金纳米颗粒表面上cRGD肽数量
2.3.3探针活性检测
2.3.4探针速率变化与整联蛋白与cRGD配体相互作用的关联
2.3.5谱聚类隐马尔可夫模型(SC-HMM)识别结合和解离状态
2.3.6单分子反应动力学研究
2.4 小结
第3章 Mn2+对整联蛋白与配体相互作用动力学调控研究
3.1前言
3.2 实验部分
3.2.1实验试剂和仪器
3.2.2 Mn2+对整联蛋白与cRGD配体相互作用的影响
3.2.3单颗粒成像实验
3.2.4流式细胞分析
3.2.5激活因子引起的受体与配体结合和解离过程的能垒变化
3.3结果与讨论
3.3.1 Mn2+对整联蛋白与cRGD配体作用的影响
3.3.2 Mn2+对整联蛋白与cRGD配体相互作用动力学调控研究
3.3.3基于流式细胞术分析整联蛋白与cRGD配体动力学
3.4小结
第4章 核酸适配体与靶蛋白分子相互作用的研究
4.1前言
4.2实验部分
4.2.1实验试剂和仪器
4.2.2银纳米颗粒的制备与修饰
4.2.3细胞培养
4.2.4 Apt@AgNPs特异性研究
4.2.5暗场成像实验
4.3结果与讨论
4.3.1银纳米颗粒的表征
4.3.2 Apt@AgNPs特异性研究
4.3.3 TLS11a与HepG2细胞膜上受体蛋白相互作用初步研究
4.4小结
结 论
参考文献
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文
致 谢