2b-羟基-去-D-杰氏山竹子素A的体外成骨活性

摘要

人面果是一种传统傣药，具有清热退火，消肿止痛，活血化瘀的疗效，临床上常用于风湿跌打损伤以及骨折的治疗。目前对人面果的研究主要针对其化合物成分的提取和分离，而对其所含化合物相关生物活性的研究较少。本研究以人面果提取物2b-羟基-去-D-杰氏山竹子素 A（简称 bHGA）为研究对象，探讨了其对体外培养的成骨细胞生物活性的影响，以期阐明其是否具有开发应用前景。
　　本文主要研究了bHGA对成骨细胞系MC3T3-E1细胞存活率、ALP活性、体外矿化以及成骨相关基因mRNA表达的影响。Alamar Blue实验结果表明，16μmol/L的bHGA对成骨细胞有明显的细胞毒性，故选定2μmol/L，4μmol/L和8μmol/L浓度的bHGA用于后续实验的研究。碱性磷酸酶活性检测表明，bHGA对成骨细胞 ALP活性有短期抑制作用，长期处理无显著影响。茜红素染色表明，4μmol/L和8μmol/L的bHGA促进细胞基质的矿化。荧光定量PCR结果显示，bHGA抑制ALP，Runx2，Osterix基因的表达，因此，不利于间充质干细胞向成骨细胞的分化。但其在整个培养过程中，bHGA显著的促进Col-1、OCN的表达；长期处理（16天）也显著促进BSP和BMP2的表达水平，说明bHGA对骨基质的成熟和骨基质矿化具有促进作用。

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第 1 章 前 言

1.1骨形成生物学

1.2天然产物促进成骨细胞活性研究进展

1.3人面果及藤黄属研究进展

1.4本研究的意义

第2章bHGA对成骨细胞增殖的影响

2.1引言

2.2实验材料和方法

2.3实验结果

3.4讨论

第3章 bHGA对成骨细胞ALP活性的影响

3.1引言

3.2材料和实验方法

3.3结果

4.4讨论

第4章bHGA对成骨细胞体外矿化的影响

4.1引言

4.2材料和方法

4.3结果

4.4讨论

第5章bHGA对成骨细胞成骨相关基因表达的影响

5.1引言

5.2材料和实验方法

5.3实验结果

5.4讨论

结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的论文