榉树的生物学特性和微繁技术研究

摘要

该文从植物形态学、分子生物学和细胞工程的角度出发,研究榉树的生物学和细胞生物学特性,阐明榉树遗传变异的规律,为开展榉树原生质体培养、细胞融合等细胞工程的研究提供理论依据.该研究首次在阔叶硬木乔木树种大叶榉中通过直接器官发生和间接器官发生两种途径成功地获得了完整再生植株;首次研究发现,大叶榉组织培养再生植株的形态发生途径除了有器官发生途径外,还有体细胞胚发生途径;初步建立了大叶榉胚性细胞的悬浮培养体系,研究了影响悬浮培养的细胞生长的各种因素,为大叶榉优良无性系的工厂化微繁和遗传改良提供了理论依据和实验方法,为珍稀树种的保护和利用提供了细胞生物技术;首次从个体、细胞和分子3个水平上比较研究了榉属3个种的生物学特性、染色体的组成和DNA水平上的差异,分析了它们的核型特征,得出了核型公式;首次将RAPD技术应用于大叶榉组织培养物和再生植株的遗传稳定性研究,从染色体和DNA两个层次的研究结果表明,大叶榉属于遗传性较稳定的植物.从而充实了树木细胞工程和生物学理论,为进一步研究榉属植物提供了新的基础理论和研究数据.

目录

摘要

缩略词

1文献综述

1.1植物组织细胞培养的研究进展

1.1.1植物组织细胞培养技术的产生与发展

1.1.2植物组织细胞培养中的形态发生

1.1.3植物组织细胞培养物的遗传变异

1.1.4 RAPD技术在植物组织细胞培养中的应用和存在的问题

1.2林木组织细胞培养技术研究的应用及发展方向

1.2.1快速繁殖

1.2.2种质保存

1.2.3人工种子的生产

1.2.4突变体的诱导和筛选

1.2.5原生质体培养及融合在基因工程中的应用

1.2.6细胞悬浮培养技术在林木中的应用

1.2.7问题和展望

1.3榉属植物的研究进展

1.3.1榉树资源

1.3.2环境条件对榉树生长的影响

1.3.3榉树的繁殖方式

1.3.4榉树的应用

1.3.5存在的问题

2研究的背景、目的意义，研究内容和技术路线

2.1研究的背景

2.2本研究的项目依托和研究意义

2.3主要研究内容

2.4主要技术路线

3材料与方法

3.1材料

3.1.1榉属植物形态特征和遗传特性研究材料

3.1.2榉树组织培养材料

3.1.3遗传稳定性研究材料

3.2方法

3.2.1榉属植物的形态特征研究方法

3.2.2细胞分裂周期及染色体数目观察

3.2.3 DNA的抽提和RAPD分析

3.2.4组织培养实验方法

3.2.5细胞悬浮培养

3.2.6大叶榉组织培养物的形态发生

4结果与分析

4.1榉属3种植物形态特征、生物学特性和遗传特性的比较研究

4.1.1形态特征和生物学特性

4.1.2榉属植物的遗传学特性

4.1.3小结

4.2大叶榉愈伤组织的诱导和植株再生

4.2.1愈伤组织的诱导

4.2.3愈伤组织的继代培养

4.2.4不定芽的分化

4.2.5诱导生根

4.2.6炼苗和移栽试验

4.2.7小结

4.3大叶榉愈伤组织和再生植株的遗传稳定性

4.3.1大叶榉树愈伤组织和再生植株的染色体数目

4.3.2再生植株的DNA抽提和RAPD分析

4.3.3小结

4.4大叶榉愈伤组织的细胞悬浮培养

4.4.1 不同初始密度下细胞生长的动态变化

4.4.2 摇床转速实验

4.4.3 糖的种类和浓度对细胞生长的影响

4.4.4 有机成分和激素对悬浮细胞生长的影响

4.4.5底物消耗的动力学变化

4.4.6悬浮培养过程中的电导率及pH的变化

4.4.7小结

4.5大叶榉组织培养再生植株的形态发生

4.5.1器官发生途径的观察

4.5.2体细胞胚发生途径的观察

4.5.3大叶榉树悬浮培养的形态发生

4.5.4小结

5结论与讨论

5.1结论

5.2讨论

5.2.1培养基对愈伤组织诱导和植株再生的影响

5.2.2植物激素对愈伤组织诱导和植株再生的影响

5.2.3外植体对愈伤组织诱导和植株再生的影响

5.2.4愈伤组织的继代培养和抗氧化剂的作用

5.2.5植物组织培养的形态发生与遗传稳定性

5.2.6 RAPD技术在组织培养物遗传稳定性鉴定中的应用

6本研究的创新点

参考文献

Abstract

彩色图版

附表

感谢

附录