五子衍宗方对环磷酰胺致小鼠肝脏DNA损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的:通过腹腔注射环磷酰胺建立小鼠DNA损伤模型,探讨五子衍宗方对环磷酰胺造成的肝脏DNA损伤的保护作用,并研究其作用机制。
　　方法:将Babl/C小鼠随机分为正常对照组、模型组、五子衍宗方低、高剂量组。五子衍宗方低剂量(100 mg/kg),五子衍宗方高剂量组(200 mg/kg)预给药一周之后,除正常对照组之外,其余各组腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg三次,隔天给药,同时五子衍宗方低,高剂量组继续给药,末次给予环磷酰胺后禁食12h处死小鼠。检测小鼠的体重,肝脏重量,肝脏指数,血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活力,HE染色检测肝脏的组织病理学变化,单细胞凝胶电泳技术检测肝脏细胞的DNA损伤,检测肝脏匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量,Elisa检测肝脏和血清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量,PCR检测肝脏中SOD1 mRNA、SOD2 mRNA、SOD3 mRNA表达,Western blot检测肝脏组织中γ-H2AX、Ku70的蛋白表达,免疫荧光检测53BP1的表达。
　　结果:五子衍宗方能够升高小鼠的体重,肝脏重量,肝脏指数,降低ALT、AST的活力(P<0.05或P<0.01);HE染色发现五子衍宗方组减轻肝脏组织细胞肿胀和空泡变性;低、高剂量的五子衍宗方均可以改善肝脏的DNA的损伤,降低小鼠肝脏中的Olive尾矩、尾距、尾长和尾部DNA含量(P<0.05或P<0.01);五子衍宗方可以提高机体的抗氧化能力,体现在降低肝脏和血清中的8-OHdG的含量,降低肝脏中MDA的含量,提高SOD和GPX的活力,提高SOD1 mRNA、SOD2 mRNA、SOD3 mRNA的表达(P<0.05或P<0.01);五子衍宗方通过升高肝脏中ku70的蛋白表达,降低γ-H2AX和53BP1的表达,提高机体的修复DNA损伤的能力,促进DNA修复。(P<0.05或P<0.01)。
　　结论:五子衍宗方能够减轻CTX引起的小鼠肝脏的DNA损伤,其机制可能与五子衍宗方提高机体的抗氧化能力及增强机体的DNA修复的能力有关。

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英文缩略词表

引言

材料与方法

1.1 材料

1.2 实验方法

结果

2.1五子衍宗方对小鼠体重及肝脏指数的影响

2.2五子衍宗方对小鼠血清中ALT和AST变化影响

2.3五子衍宗方对小鼠肝脏组织病理学的影响

2.4五子衍宗方对小鼠肝脏DNA损伤的影响

2.5 五子衍宗方对小鼠8-OHdG含量的影响

2.6五子衍宗方对小鼠肝脏GSH-Px、SOD、MDA的影响

2.7五子衍宗方对小鼠肝脏SOD1 mRNA、SOD2 mRNA、SOD3 mRNA的表达的影响

2.8五子衍宗方对小鼠肝脏中γ-H2AX的蛋白表达的影响

2.9五子衍宗方对小鼠肝脏中53BP1免疫荧光的影响

2.10五子衍宗方对小鼠肝脏中Ku70的蛋白表达的影响

讨论

小结

参考文献

综述

后记

附录：攻读硕士学位期间发表的部分学术论著