超氧化物歧化酶模拟化合物对离体肿瘤细胞的影响

摘要

为了检测SOD模拟化合物[Mn(EDTB)(AC)]和(Cu<,2>C<,21>N<,14>H<,27>Cl<,13>)的抗癌活性,该实验以口腔颊黏膜细胞、肝癌细胞SSMC-7721细胞株、胎儿肝细胞L-02细胞株为材料,开展以下实验:①彗星实验---MSOD对口腔颊黏膜细胞DNA的影响,寻找此种MSOD对正常细胞的安全剂量范围;②绘制生长曲线,反映不同浓度MSOD对细胞生长的影响;③MTT比色分析,检测两种模拟化合物对SSMC-772l细胞的增殖抑制作用;④彗星实验、基因组DNA的提取和凝胶电泳实验,研究SOD模拟化合物对肝癌细胞SSMC-7721细胞株和胎儿肝细胞L-02细胞株DNA的影响;⑤流式细胞仪检测MSOD对细胞周期分布的影响;⑥细胞内源SOD活力及蛋白质含量的检测,探讨细胞内外环境SOD活力、蛋白含量变化.实验结果表明:发现外源抗氧化剂SOD模拟化合物,能改变肝癌细胞SSMC-7721内氧化还原水平,阻止DNA复制,抑制癌细胞的增殖,为SOD模拟化合物开发成为一种治疗肿瘤的新药提供重要的科学依据.

目录

文摘

英文文摘

前言

材料与方法

一、材料、试剂和仪器

1.供试细胞系

2.超氧化物歧化酶模拟化合物

3.细胞培养基

4.体外细胞培养基本制剂的配制

5.单细胞凝胶电泳法细胞裂解液

6.琼脂糖凝胶电泳实验

7.其它试剂

8.主要仪器

二.实验方法

1.彗星实验---MSOD对口腔颊黏膜细胞DNA的影响

2.制作生长曲线

3.MTT比色分析

4.基因组DNA的提取和凝胶电泳

5.单细胞凝胶电泳技术检测SOD模拟化合物对离体肝癌细胞的影响

6.细胞周期分布测定

7.细胞内源超氧化物歧化酶SOD活力及蛋白质含量的检测

实验结果

1.彗星实验---MSOD对口腔颊黏膜细胞DNA的影响

2.制作生长曲线

3.细胞形态学观察

4.MTT比色分析

4.1 MnMSOD和CuMSOD对SSMC-7721肝癌细胞株的抑制作用

4.2 MnMSOD对L-02人胎肝细胞活性的影响

5.基因组DNA的提取和凝胶电泳

6.单细胞凝胶电泳技术检测SOD模拟化合物对离体肝癌细胞的影响

7.细胞周期分布测定

8.细胞内源超氧化物歧化酶SOD活力及蛋白质含量的检测

分析与讨论

1.彗星实验---MSOD对口腔黏膜细胞DNA的影响

2.SOD模拟化合物对肝癌细胞增殖的影响

2.1生长曲线

2.2 MTT比色分析

2.3 SOD模拟化合物对人肝癌细胞DNA的影响

2.4 SOD模拟化合物对人肝癌细胞生长周期的影响

2.5对细胞内源超氧化物歧化酶SOD活力及蛋白质含量的影响

3.SOD模拟化合物对人肝癌细胞抑制作用机制的探讨

4.展望

参考文献

论文发表情况

致谢